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林可霉素是一种广泛应用于畜禽养殖中的抗生素，但其过量使用会对人体健康造成危害。因此，对饲料中林可霉素的测定显得尤为重要。本标准采用超高效液相色串联质谱法进行测定，具有灵敏度高、准确性好、操作简便等优点。

1. 范围
本标准适用于饲料中林可霉素的测定。

2. 原理
将样品中的林可霉素提取出来，经过净化处理后，采用超高效液相色串联质谱法进行测定。

3. 试剂和材料
3.1 甲醇（色谱纯）
3.2 乙腈（色谱纯）
3.3 离子交换树脂
3.4 氨水
3.5 林可霉素标准品
3.6 饲料样品

4. 仪器设备
4.1 超高效液相色谱质谱联用仪
4.2 离子交换色谱柱
4.3 恒温振荡器
4.4 离心机

5. 操作步骤
5.1 样品制备
取适量饲料样品，粉碎后称取1g，加入10mL甲醇，振荡提取30min，离心10min，取上清液过滤，取1mL上清液加入10mL乙腈中，振荡提取30min，离心10min，取上清液过滤，即为待测样品。

5.2 标准曲线制备
取林可霉素标准品，加入适量甲醇中，制备1mg/mL的林可霉素标准溶液。取不同浓度的标准溶液，分别加入适量甲醇中，制备不同浓度的标准曲线。

5.3 超高效液相色谱质谱联用条件
色谱柱：离子交换色谱柱
流动相：A液为0.1%氨水水溶液，B液为乙腈
梯度程序：0-2min，5% B；2-5min，5%-95% B；5-6min，95% B；6-6.1min，95%-5% B；6.1-8min，5% B
流速：0.3mL/min
柱温：30℃
进样量：5μL
质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子模式，多反应监测（MRM）

5.4 林可霉素测定
将待测样品和标准曲线溶液分别进样，进行超高效液相色谱质谱联用分析，根据峰面积比值计算出样品中林可霉素的含量。

6. 结果计算
6.1 林可霉素的含量计算公式为：
C = (A/B) × C0
其中，C为样品中林可霉素的含量（μg/kg），A为样品中林可霉素的峰面积，B为标准曲线中林可霉素的峰面积，C0为标准曲线中林可霉素的浓度（μg/mL）。

6.2 样品中林可霉素的检出限为10μg/kg。

7. 结论
本标准采用超高效液相色串联质谱法进行饲料中林可霉素的测定，具有灵敏度高、准确性好、操作简便等优点，可用于饲料中林可霉素的监测。

相关标准：
GB/T 23594-2009 饲料中林可霉素的测定 液相色谱法
GB/T 23595-2009 饲料中四环素类药物的测定 液相色谱法
GB/T 23596-2009 饲料中磺胺类药物的测定 液相色谱法
GB/T 23597-2009 饲料中氯霉素的测定 液相色谱法
GB/T 23598-2009 饲料中链霉素的测定 液相色谱法