猪传染性胃肠炎病毒是一种高度传染性的病毒，能引起猪的急性胃肠炎，严重影响猪的生长发育和养殖业的经济效益。为了及时、准确地检测PEDV，保障猪的健康和养殖业的发展，制定了本标准。

1. 范围
本标准适用于猪粪便、肠道、血清、组织等样品的PEDV检测。

2. 试剂和设备
2.1 RNA提取试剂盒
2.2 RT-PCR试剂盒
2.3 PCR仪
2.4 离心机
2.5 超净工作台
2.6 常规实验室设备

3. 样品处理
3.1 粪便样品
取1g粪便加入10ml无菌PBS缓冲液中，混匀后离心，取上清液作为检测样品。
3.2 肠道、组织样品
取适量样品加入PBS缓冲液中，制备10%（w/v）的悬浮液，离心后取上清液作为检测样品。
3.3 血清样品
取适量血清样品，离心后取上清液作为检测样品。

4. RNA提取
按照RNA提取试剂盒说明书进行操作，提取样品中的总RNA。

5. RT-PCR检测
5.1 RT-PCR反应体系
按照RT-PCR试剂盒说明书进行操作，制备RT-PCR反应体系。
5.2 PCR程序
按照RT-PCR试剂盒说明书进行操作，进行PCR扩增反应。
5.3 结果判定
根据PCR扩增结果，判定样品中是否存在PEDV。

6. 结果分析
6.1 阳性结果
样品中出现明显的特异性条带，且条带大小符合PEDV的特征。
6.2 阴性结果
样品中未出现特异性条带。

相关标准
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