DB21/T 2627-2016
鱼淋巴囊肿病毒实时定量PCR 检测方法
发布时间:2016-05-09 实施时间:2016-07-09


鱼淋巴囊肿病毒是一种常见的鱼类病原体,能够引起鱼类淋巴囊肿病。为了保障水产品的质量安全,需要对鱼类样品中的鱼淋巴囊肿病毒进行检测。本标准旨在规定鱼淋巴囊肿病毒实时定量PCR检测方法的要求和检测步骤,以提高检测的准确性和可靠性。

1.范围
本标准适用于鱼类样品中鱼淋巴囊肿病毒的检测。

2.引用文件
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质量规格和评价(ISO 3696:1987,MOD)
GB/T 14233.1-2008 检验检疫实验室技术规范 第1部分:通用要求
GB/T 19495.1-2004 分子生物学实验室质量管理 第1部分:通用要求
GB/T 2626-2006 呼吸防护用品 自吸过滤式防颗粒物呼吸器
GB/T 2627-2006 呼吸防护用品 面罩式过滤式防颗粒物呼吸器

3.术语和定义
3.1 鱼淋巴囊肿病毒
指引起鱼类淋巴囊肿病的病原体。
3.2 实时定量PCR
指在PCR反应过程中,通过荧光信号实时监测PCR产物的累积量,并根据标准曲线计算出样品中目标序列的数量。
3.3 标准曲线
指一系列已知浓度的标准品制备的PCR产物的荧光信号与浓度之间的关系曲线。
3.4 检测限
指在特定条件下,检测方法能够检测到的最低目标序列的数量。

4.检测方法
4.1 样品处理
将鱼类样品取适量,加入适量的缓冲液,经过离心等处理,得到样品提取液。
4.2 DNA提取
使用商用DNA提取试剂盒或自制试剂盒提取样品中的DNA。
4.3 PCR反应
将提取的DNA加入PCR反应体系中,进行实时定量PCR反应。
4.4 数据分析
根据标准曲线计算出样品中目标序列的数量,并判断样品是否阳性或阴性。

5.质量控制
5.1 实验室环境
实验室应具备良好的通风条件,避免污染和交叉感染。
5.2 试剂和仪器
使用符合质量要求的试剂和仪器,确保检测结果的准确性和可靠性。
5.3 质量控制样品
使用质量控制样品进行实验室内部质量控制,确保检测结果的准确性和可靠性。
5.4 检测限
应根据实验室的具体情况确定检测限,并在检测过程中进行监测。

相关标准:
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质量规格和评价(ISO 3696:1987,MOD)
GB/T 14233.1-2008 检验检疫实验室技术规范 第1部分:通用要求
GB/T 19495.1-2004 分子生物学实验室质量管理 第1部分:通用要求
GB/T 2626-2006 呼吸防护用品 自吸过滤式防颗粒物呼吸器
GB/T 2627-2006 呼吸防护用品 面罩式过滤式防颗粒物呼吸器