DB21/T 2742-2017
饲料中动物源性成分—貂源性组织成分定性检测方法PCR 方法
发布时间:2017-02-23 实施时间:2017-03-23


饲料中添加动物源性成分是为了提高饲料的营养价值,但是如果添加的动物源性成分不符合规定,就会对动物的健康产生影响。因此,对饲料中的动物源性成分进行检测是非常必要的。

本标准适用于饲料中动物源性成分—貂源性组织成分的定性检测。该方法基于PCR 技术,通过检测DNA 片段来判断饲料中是否存在貂源性组织成分。

试验步骤如下:

1. 样品制备

将饲料样品取1 g,加入10 mL 的去离子水中,振荡混合,离心10 min,取上清液备用。

2. DNA 提取

将上清液取1 mL,加入离心管中,离心10 min,弃去上清液,加入200 μL 的DNA 提取液,振荡混合,65 ℃ 水浴30 min,离心10 min,取上清液备用。

3. PCR 反应

将提取的DNA 模板加入PCR 反应管中,加入PCR 反应液,进行PCR 反应。PCR 反应条件如下:

预变性:95 ℃,5 min

循环反应:95 ℃,30 s;55 ℃,30 s;72 ℃,30 s,共35 次

终止延伸:72 ℃,10 min

4. PCR 产物检测

将PCR 反应产物进行凝胶电泳,观察是否存在目标DNA 片段。

本标准要求PCR 反应产物的目标DNA 片段长度为200 bp 左右,如果存在该长度的DNA 片段,则判断饲料中存在貂源性组织成分。

相关标准
GB/T 22487-2008 饲料中动物源性成分检测方法
GB/T 22488-2008 饲料中植物源性成分检测方法
GB/T 22489-2008 饲料中添加剂检测方法
GB/T 22490-2008 饲料中禁用物质检测方法
GB/T 22491-2008 饲料中微生物检测方法