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猪繁殖与呼吸综合征病毒是一种常见的猪病毒，能引起猪的呼吸道和生殖系统疾病。为了及时发现和控制猪繁殖与呼吸综合征病毒的传播，需要对其进行检测。本标准规定了猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株与高致病性变异株RT-PCR鉴别检测方法。

1.适用范围
本标准适用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测。

2.试剂和仪器
2.1 试剂
2.1.1 RNA提取试剂盒
2.1.2 RT-PCR试剂盒
2.1.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和高致病性变异株的引物和探针
2.2 仪器
2.2.1 离心机
2.2.2 PCR仪
2.2.3 凝胶成像系统

3.样品采集和处理
3.1 样品采集
3.1.1 呼吸道样品：采用鼻拭子或咽拭子采集。
3.1.2 生殖道样品：采用精液、阴道分泌物或胎盘组织等样品。
3.2 样品处理
3.2.1 呼吸道样品：将鼻拭子或咽拭子放入2ml离心管中，加入1ml无菌PBS缓冲液，离心10min，取上清液。
3.2.2 生殖道样品：将样品放入2ml离心管中，加入1ml无菌PBS缓冲液，离心10min，取上清液。

4.RNA提取和RT-PCR检测
4.1 RNA提取
按照RNA提取试剂盒说明书进行提取。
4.2 RT-PCR检测
按照RT-PCR试剂盒说明书进行检测。

5.结果判定
5.1 阳性判定
当样品的CT值小于等于40时，判定为阳性。
5.2 阴性判定
当样品的CT值大于40时，判定为阴性。

相关标准：
GB/T 22470-2008 猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测方法
GB/T 22471-2008 猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测方法
GB/T 22472-2008 猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗
GB/T 22473-2008 猪繁殖与呼吸综合征病毒活疫苗
GB/T 22474-2008 猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断试剂