DB21/T 2870-2017
大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型PCR检测方法
发布时间:2017-11-16 实施时间:2017-12-16


大肠杆菌是一种常见的肠道细菌,也是一种重要的病原菌。随着抗生素的广泛使用,大肠杆菌的耐药性不断增强,其中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是一种常见的耐药基因。ESBLs能够水解β-内酰胺类抗生素,包括第三代头孢菌素和氟喹诺酮类抗生素等,导致这些抗生素失去了治疗效果。因此,对大肠杆菌中ESBLs基因型的检测具有重要的临床和公共卫生意义。

本标准规定了大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型PCR检测方法的要求和操作步骤。该方法基于PCR技术,通过特异性引物扩增ESBLs基因,从而实现对大肠杆菌中ESBLs基因型的检测。该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,适用于临床、环境、食品等领域中大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型的检测。

具体操作步骤如下:

1. 样品处理:将待检样品进行预处理,包括细菌培养、提取DNA等步骤。

2. PCR扩增:将提取的DNA作为模板,使用特异性引物进行PCR扩增,得到目标基因片段。

3. 凝胶电泳:将PCR产物进行凝胶电泳,检测扩增产物的大小和纯度。

4. 结果判读:根据PCR扩增产物的大小和纯度,判断样品中是否存在ESBLs基因型。

本标准还规定了PCR反应体系、引物设计、PCR程序、凝胶电泳条件等具体要求,以保证检测结果的准确性和可靠性。

相关标准:
1. GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 大肠杆菌检验
2. GB/T 4789.38-2016 食品微生物学检验 超广谱β-内酰胺酶产生菌检验
3. GB/T 22470.1-2008 食品安全国家标准 食品微生物学检验 通则
4. DB21/T 2869-2017 大肠杆菌耐药性检测方法
5. DB21/T 2871-2017 大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶酶活检测方法