DB21/T 3273-2020
猪伪狂犬病毒野毒株与 gE 基因缺失疫苗株TaqMan 实时荧光定量 PCR 鉴别方法
发布时间:2020-06-30 实施时间:2020-07-30
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猪伪狂犬病是一种由猪伪狂犬病病毒引起的疾病,主要通过猪的唾液传播。该病毒对猪的危害较大,严重影响了猪的生产和养殖。为了控制猪伪狂犬病的传播,研制了一种gE基因缺失疫苗株,该疫苗株不含有gE基因,可以有效预防猪伪狂犬病的发生。
为了确保猪伪狂犬病疫苗的质量和安全性,需要对疫苗株和野毒株进行鉴别。本标准规定了一种猪伪狂犬病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法,可以快速、准确地鉴别疫苗株和野毒株。
该方法主要包括以下步骤:
1.提取病毒RNA:将病毒样品进行RNA提取,获取病毒RNA。
2.制备TaqMan探针:根据猪伪狂犬病毒gE基因序列设计TaqMan探针,用于检测病毒RNA。
3.制备PCR反应体系:将TaqMan探针、引物、酶和模板RNA混合,制备PCR反应体系。
4.进行PCR扩增:将PCR反应体系进行PCR扩增,获取PCR产物。
5.进行荧光定量PCR:将PCR产物进行荧光定量PCR,获取荧光信号。
6.分析荧光信号:根据荧光信号的大小和阈值判断样品中是否存在猪伪狂犬病毒野毒株或gE基因缺失疫苗株。
该方法具有快速、准确、灵敏、特异性高等优点,可以有效鉴别猪伪狂犬病毒野毒株和gE基因缺失疫苗株,为猪伪狂犬病的防控提供了有力的技术支持。
相关标准:
1. GB/T 22470-2008 猪伪狂犬病疫苗
2. GB/T 22471-2008 猪伪狂犬病疫苗检验规程
3. GB/T 22472-2008 猪伪狂犬病疫苗免疫程序
4. GB/T 22473-2008 猪伪狂犬病疫苗质量控制
5. GB/T 22474-2008 猪伪狂犬病疫苗包装、储存和运输