DB15/T 332-2000
用酶联免疫吸附实验检测猪瘟免疫抗体技术规程
发布时间:2000-02-14 实施时间:2000-04-15
猪瘟是一种由猪瘟病毒引起的急性、高度传染性疾病,对猪的生产和经济造成了严重的影响。为了控制和预防猪瘟的发生,猪瘟疫苗的使用是非常重要的。而检测猪瘟免疫抗体的水平则是评估疫苗免疫效果的重要指标之一。酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种常用的检测猪瘟免疫抗体的方法,本标准就是针对这种方法进行规范。
1. 适用范围
本标准适用于用酶联免疫吸附实验检测猪瘟免疫抗体的方法和技术要求,以及结果的判定和报告。
2. 试剂和设备
2.1 试剂
本标准所需试剂包括:猪瘟病毒抗原、酶标记的抗猪IgG抗体、酶标记的抗猪IgM抗体、PBS缓冲液、BSA、Tween-20、TMB底物液、硫酸、甲醛等。
2.2 设备
本标准所需设备包括:微孔板、洗板机、吸光度计、离心机、恒温水浴器、移液器、pH计等。
3. 检测方法
3.1 样品处理
将待测血清标本离心去除杂质,然后稀释至适当浓度。
3.2 实验步骤
将稀释后的血清标本加入微孔板中,加入猪瘟病毒抗原,经过一定时间的孵育和洗板后,加入酶标记的抗猪IgG抗体或酶标记的抗猪IgM抗体,再次孵育和洗板后,加入TMB底物液,反应一定时间后加入硫酸停止反应,最后用吸光度计测定吸光度值。
3.3 结果判定
根据吸光度值计算样品的抗体水平,判定样品是否阳性或阴性。
4. 报告
报告应包括样品编号、检测日期、检测方法、检测结果等内容。
相关标准
GB/T 22470-2008 猪瘟病毒灭活疫苗
GB/T 22471-2008 猪瘟病毒活疫苗
GB/T 22472-2008 猪瘟病毒亚单位疫苗
GB/T 22473-2008 猪瘟病毒DNA疫苗
GB/T 22474-2008 猪瘟病毒重组疫苗