西马特罗是一种广泛应用于畜牧业的合成类激素，其在动物体内的代谢产物可以通过尿液检测。本标准采用酶联免疫吸附法测定动物尿液中西马特罗的含量。

1. 范围
本标准适用于动物尿液中西马特罗的测定。

2. 原理
将待测样品加入预先涂有抗西马特罗抗体的微孔板中，经过一定时间的孵育和洗涤后，加入与抗体结合的酶标记二抗，再次孵育和洗涤后，加入底物，底物与酶标记二抗结合，形成显色反应，通过测定反应产生的颜色强度来计算样品中西马特罗的含量。

3. 试剂和仪器
3.1 试剂
包括抗西马特罗抗体、酶标记二抗、底物等。
3.2 仪器
包括微孔板、洗板机、酶标仪等。

4. 样品处理
4.1 收集样品
收集动物尿液样品，避免污染和杂质。
4.2 样品处理
将样品离心沉淀，取上清液进行测定。

5. 操作步骤
5.1 样品稀释
将样品稀释至适宜浓度。
5.2 加样
将稀释后的样品加入预先涂有抗西马特罗抗体的微孔板中。
5.3 孵育
在37℃下孵育一定时间。
5.4 洗涤
用洗板机洗涤孔板。
5.5 加入酶标记二抗
加入与抗体结合的酶标记二抗。
5.6 孵育
在37℃下孵育一定时间。
5.7 洗涤
用洗板机洗涤孔板。
5.8 加入底物
加入底物，形成显色反应。
5.9 停止反应
加入停止液停止反应。
5.10 测定
用酶标仪测定反应产生的颜色强度。

6. 结果计算
根据标准曲线计算样品中西马特罗的含量。

7. 精密度和准确度
7.1 精密度
同一实验室内，重复测定同一样品，计算相对标准偏差（RSD）。
7.2 准确度
同一实验室内，测定已知浓度的标准品，计算回收率。

8. 检出限和测定范围
8.1 检出限
本方法的检出限为0.1 ng/mL。
8.2 测定范围
本方法的测定范围为0.1-10 ng/mL。

相关标准
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