苯乙醇胺A是一种广泛存在于动物体内的代谢产物，其浓度与动物的代谢状态、饮食习惯等因素有关。苯乙醇胺A的测定可以用于动物的健康监测、营养评估等方面。本标准采用酶联免疫吸附法进行测定，具有灵敏度高、准确性好、操作简便等优点。

1. 适用范围
本标准适用于动物尿液中苯乙醇胺A的测定。

2. 仪器和试剂
2.1 酶标仪
2.2 微孔板洗涤器
2.3 微孔板读板器
2.4 微孔板
2.5 酶标板洗涤缓冲液
2.6 酶标板稀释液
2.7 酶标板涂层液
2.8 标准品
2.9 抗体
2.10 酶标记二抗
2.11 底物
2.12 停止液
2.13 乙醇

3. 样品处理
3.1 收集动物尿液样品，避免污染和氧化。
3.2 样品离心，去除杂质。
3.3 样品稀释，使其浓度在标准曲线范围内。

4. 操作步骤
4.1 准备工作
4.1.1 将酶标板洗涤缓冲液加入洗涤器中。
4.1.2 将酶标板稀释液加入稀释板中。
4.1.3 将标准品按照不同浓度加入标准品孔中。
4.1.4 将样品加入样品孔中。
4.1.5 将抗体加入抗体孔中。
4.1.6 将酶标记二抗加入酶标记二抗孔中。
4.1.7 将底物加入底物孔中。
4.1.8 将停止液加入停止液孔中。
4.2 操作步骤
4.2.1 加入酶标板涂层液，孵育。
4.2.2 洗涤酶标板。
4.2.3 加入标准品、样品、抗体、酶标记二抗，孵育。
4.2.4 洗涤酶标板。
4.2.5 加入底物，孵育。
4.2.6 加入停止液，测定吸光度值。
4.3 计算结果
根据标准曲线计算样品中苯乙醇胺A的浓度。

5. 结果表达
结果应以浓度值表示，单位为μg/mL。

6. 精密度和准确度
6.1 精密度
同一实验室内，重复测定10次，CV不应大于10%。
6.2 准确度
与同类方法比较，回收率应在90%~110%之间。

7. 检出限和定量限
7.1 检出限
检出限为0.01μg/mL。
7.2 定量限
定量限为0.05μg/mL。

相关标准
GB/T 5009.268-2016 食品中苯乙醇胺A的测定 气相色谱-质谱法
GB/T 5009.267-2016 食品中苯乙醇胺A的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.266-2016 食品中苯乙醇胺A的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.265-2016 食品中苯乙醇胺A的测定 液相色谱法
GB/T 5009.264-2016 食品中苯乙醇胺A的测定 气相色谱法