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饲料中总糖的测定是饲料分析中的一个重要指标，对于饲料的营养价值评估和饲料配方设计具有重要意义。本标准采用分光光度法测定饲料中总糖的含量。

1. 原理
将饲料样品加入硫酸，使其水解为糖，再加入苯酚和硫酸，生成紫色化合物，其吸收波长为490nm。根据标准糖溶液的吸光度值，计算出饲料中总糖的含量。

2. 仪器和设备
分光光度计、移液器、比色皿、恒温水浴器等。

3. 试剂和材料
(1) 硫酸：质量分数为98%。
(2) 苯酚：质量分数为1%。
(3) 葡萄糖：纯度不低于99.5%。
(4) 蔗糖：纯度不低于99.5%。
(5) 葡萄糖标准溶液：浓度为1mg/mL。
(6) 蔗糖标准溶液：浓度为1mg/mL。

4. 样品的制备
将饲料样品研磨成粉末，取适量样品称入容量瓶中，加入适量的硫酸，摇匀，放置于恒温水浴器中水浴30min，冷却至室温，加入适量的苯酚，摇匀，再加入适量的硫酸，摇匀，放置于室温下15min，用蒸馏水定容，摇匀，过滤，取滤液作为样品。

5. 操作步骤
(1) 取不同浓度的葡萄糖标准溶液和蔗糖标准溶液，分别加入试管中，加入适量的硫酸，摇匀，放置于恒温水浴器中水浴30min，冷却至室温，加入适量的苯酚，摇匀，再加入适量的硫酸，摇匀，放置于室温下15min，用蒸馏水定容，摇匀，测定吸光度值。
(2) 取样品10mL，加入试管中，加入适量的硫酸，摇匀，放置于恒温水浴器中水浴30min，冷却至室温，加入适量的苯酚，摇匀，再加入适量的硫酸，摇匀，放置于室温下15min，用蒸馏水定容，摇匀，测定吸光度值。
(3) 根据标准糖溶液的吸光度值，计算出样品中总糖的含量。

6. 结果计算
(1) 标准曲线的绘制：将葡萄糖标准溶液和蔗糖标准溶液的吸光度值绘制成标准曲线。
(2) 样品的测定：根据样品的吸光度值，查找标准曲线，计算出样品中总糖的含量。

7. 数据处理
(1) 样品的测定结果应该进行重复测定，计算平均值。
(2) 计算出样品中总糖的含量后，应该进行数据的统计分析。

相关标准：
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