ISO 8870:2006
Milk and milk-based products — Detection of thermonuclease produced by coagulase-positive staphylococci
发布时间:2006-04-27 实施时间:


凝固酶阳性葡萄球菌是一种常见的食源性病原菌,可以在牛奶及奶制品中生长繁殖,产生热稳定的核酸酶。这种酶可以破坏牛奶中的DNA和RNA,导致牛奶变质,影响食品的质量和安全。因此,检测凝固酶阳性葡萄球菌产生的热核酸酶对于保障食品安全至关重要。

ISO 8870:2006 标准规定了一种检测凝固酶阳性葡萄球菌产生的热核酸酶的方法。该方法基于热稳定的核酸酶在高温下的活性,通过加热和冷却的方式来检测样品中是否存在该酶。具体步骤如下:

1. 取样品10 mL,加入10 mL的磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中,混匀。

2. 在100℃下加热10分钟,使样品中的细胞破裂,释放出核酸酶。

3. 将样品迅速冷却至0℃以下,停止核酸酶的活性。

4. 加入热稳定的DNA或RNA,使其与样品中的核酸酶结合。

5. 在37℃下孵育30分钟,使DNA或RNA与核酸酶结合。

6. 加入DNA或RNA染料,观察是否有颜色变化。

如果样品中存在凝固酶阳性葡萄球菌产生的热核酸酶,样品中的DNA或RNA会被酶降解,无法与染料结合,不会出现颜色变化。如果样品中不存在该酶,则DNA或RNA与染料结合,出现颜色变化。

该方法简单、快速、灵敏,可以检测出样品中极低浓度的凝固酶阳性葡萄球菌产生的热核酸酶。该方法适用于牛奶及奶制品中凝固酶阳性葡萄球菌的检测。

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