：
一、范围
本标准规定了兔黏液瘤病琼脂凝胶免疫扩散试验方法。

二、试验原理
将待检血清与黏液瘤病抗原在琼脂凝胶板上进行扩散反应，根据扩散线的长度和强度判断血清中是否含有黏液瘤病抗体。

三、试验方法
1.试验前准备
（1）琼脂凝胶板：直径为90mm，厚度为4mm，孔径为3mm，孔距为9mm，孔数为12个。
（2）黏液瘤病抗原：用黏液瘤病细胞培养液制备。
（3）标准血清：黏液瘤病抗体阳性血清和阴性血清各一份。
（4）试验器材：移液器、吸球、显微镜等。
2.试验操作
（1）将琼脂凝胶板放在水平台上。
（2）用移液器将黏液瘤病抗原滴入琼脂凝胶板的孔中，每孔滴入10μl。
（3）将待检血清和标准血清分别滴入琼脂凝胶板的孔中，每孔滴入10μl。
（4）将琼脂凝胶板放置在湿润的容器中，避免干燥。
（5）在25℃下静置反应，反应时间为24小时。
（6）观察琼脂凝胶板上的扩散线，根据线的长度和强度判断血清中是否含有黏液瘤病抗体。
四、结果判定
（1）阳性对照：黏液瘤病抗体阳性血清中应有明显的扩散线。
（2）阴性对照：黏液瘤病抗体阴性血清中不应有扩散线。
（3）待检血清：如有扩散线，则为阳性；如无扩散线，则为阴性。
五、注意事项
（1）试验前应将琼脂凝胶板放在水平台上，避免试验过程中移动。
（2）试验过程中应避免琼脂凝胶板干燥。
（3）试验过程中应注意卫生，避免污染。
（4）试验结果应结合临床症状和其他检查结果进行综合分析。
六、报告内容
试验结果应包括待检血清的名称、试验日期、试验结果等内容。
七、质量控制
（1）黏液瘤病抗原的制备应符合质量要求。
（2）标准血清的制备应符合质量要求。
（3）试验操作应符合规范要求。
（4）试验结果应符合质量要求。
八、参考文献
[1] GB/T 16886.1-2017 微生物学检验方法通用要求和指南
[2] GB/T 16886.5-2017 微生物学检验方法质量控制
[3] GB/T 16886.6-2017 微生物学检验方法生物安全评价
[4] NY/T 546-2002 兔黏液瘤病血清学检测方法
[5] NY/T 548-2002 兔黏液瘤病酶联免疫吸附试验方法

相关标准：
GB/T 16886.1-2017 微生物学检验方法通用要求和指南
GB/T 16886.5-2017 微生物学检验方法质量控制
GB/T 16886.6-2017 微生物学检验方法生物安全评价
NY/T 546-2002 兔黏液瘤病血清学检测方法
NY/T 548-2002 兔黏液瘤病酶联免疫吸附试验方法