一、范围
本标准适用于饲料中盐酸克仑特罗的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水质规格及试验方法
GB/T 6688 分析化学实验室安全规程
GB/T 8170 数字表示法和圆整规则
GB/T 12182 工业用盐酸克仑特罗

三、原理
样品经提取后，用高效液相色谱法测定盐酸克仑特罗的含量。

四、仪器设备和试剂
4.1 仪器设备
高效液相色谱仪
色谱柱：C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）
移液器：1mL、5mL、10mL、20mL
超声波清洗器
电子天平
4.2 试剂
甲醇（色谱纯）
乙腈（色谱纯）
磷酸二氢钾（AR）
磷酸氢二钠（AR）
乙酸（AR）
盐酸克仑特罗（纯品）

五、样品的制备
将样品粉碎，混匀后取适量样品，称量精确，加入磨砂器中，加入10倍体积的甲醇，超声波处理30min，离心10min，取上清液，过滤，取滤液1mL，加入10mL磷酸二氢钾溶液，用乙酸调节pH至3.0，用乙腈定容至50mL，摇匀，过滤，取滤液1mL，注入高效液相色谱仪中进行测定。

六、操作步骤
6.1 仪器预热
开机预热，按照仪器说明进行操作。
6.2 色谱柱的平衡
用甲醇-水（70:30）溶液平衡色谱柱，流速为1.0mL/min，直至基线稳定。
6.3 样品的测定
取1mL样品，加入10mL磷酸二氢钾溶液，用乙酸调节pH至3.0，用乙腈定容至50mL，摇匀，过滤，取滤液1mL，注入高效液相色谱仪中进行测定。
6.4 色谱条件
流动相：甲醇-水（70:30）
流速：1.0mL/min
柱温：30℃
检测波长：220nm
进样量：20μL

七、计算
用标准曲线法计算盐酸克仑特罗的含量。

八、质量控制
8.1 标准品的制备
取盐酸克仑特罗纯品，称量精确，用甲醇定容至1000mg/L，制备标准品。
8.2 标准曲线的制备
取盐酸克仑特罗标准品，分别加入磷酸二氢钾溶液，用乙酸调节pH至3.0，用乙腈定容至50mL，摇匀，过滤，取滤液1mL，注入高效液相色谱仪中进行测定，制备标准曲线。

九、结果报告
报告盐酸克仑特罗的含量，保留两位小数。

十、精密度和准确度
10.1 精密度
在同一天内，重复测定6次，计算相对标准偏差，不大于2.0%。
10.2 准确度
加入已知量的盐酸克仑特罗标准品，进行测定，回收率在98%~102%之间。

相关标准
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GB/T 8170 数字表示法和圆整规则
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GB/T 22239 饲料中兽药残留量的测定