猪轮状病毒是一种常见的猪病毒,能引起猪的胃肠道疾病,严重时可导致猪的死亡。为了及时发现和控制猪轮状病毒的传播,需要对猪进行抗体检测。本标准旨在规范猪轮状病毒间接ELISA抗体检测方法,提高检测结果的准确性和可靠性。
1. 要求
本标准适用于猪血清中猪轮状病毒抗体的检测。检测结果应具有可重复性、准确性和特异性。
2. 试剂和设备
2.1 试剂
本标准所需试剂包括:猪轮状病毒抗原、酶标记的抗猪IgG二抗、TMB底物、停止液、洗涤缓冲液、稀释液等。
2.2 设备
本标准所需设备包括:微孔板、洗板机、酶标仪、离心机、移液器、恒温箱等。
3. 操作步骤
3.1 样品处理
将待测血清标记为阳性、阴性和空白对照,离心去除血浆,收集血清,进行稀释。
3.2 试剂配置
按照说明书配置试剂,保证试剂的质量和稳定性。
3.3 操作步骤
将稀释后的血清加入微孔板中,加入猪轮状病毒抗原,孵育后洗板,加入酶标记的抗猪IgG二抗,孵育后洗板,加入TMB底物,孵育后加入停止液,测量吸光度值。
4. 结果判定
根据吸光度值计算样品的抗体滴度,判定阳性、阴性和空白对照。
5. 质量控制
5.1 内部质量控制
每批次检测应设置阳性、阴性和空白对照,确保试剂和设备的稳定性和准确性。
5.2 外部质量控制
参加国家或地方质量控制项目,定期进行质量控制,确保检测结果的准确性和可靠性。
6. 结果报告
应记录样品编号、检测日期、检测人员、检测方法、检测结果等信息,并保存原始数据和结果报告。
相关标准
GB/T 21415-2008 猪轮状病毒抗体检测方法
NY/T 3469-2019 猪瘟病毒间接ELISA抗体检测方法
NY/T 3470-2019 猪繁殖与呼吸综合征病毒间接ELISA抗体检测方法
NY/T 3471-2019 猪蓝耳病毒间接ELISA抗体检测方法
NY/T 3472-2019 猪病毒性腹泻病毒间接ELISA抗体检测方法