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家蚕核型多角体病毒是一种常见的家蚕病毒,能够引起家蚕的疾病,对家蚕养殖业造成了很大的危害。因此,对家蚕核型多角体病毒的检测非常重要。目前,荧光定量PCR法已经成为一种常用的检测方法,本标准就是为了规范家蚕核型多角体病毒检测荧光定量PCR法的操作流程和结果判定。
1.范围
本标准适用于家蚕核型多角体病毒的检测。
2.标准引用文件
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质规格和检验方法
GB/T 14233.1-2008 电子产品可靠性试验 第1部分:通用试验方法
GB/T 14233.2-2005 电子产品可靠性试验 第2部分:试验B:借助于试验设备的试验
GB/T 14233.3-2005 电子产品可靠性试验 第3部分:试验Ca:可靠性试验的基本程序和方法
GB/T 14233.4-2005 电子产品可靠性试验 第4部分:试验Db:试验的方法和程序
3.术语和定义
3.1 家蚕核型多角体病毒
指感染家蚕的一种病毒,能够引起家蚕的疾病。
3.2 核酸提取
指从样品中提取出核酸的过程。
3.3 荧光定量PCR
指利用荧光探针对PCR产物进行定量检测的PCR方法。
4.样品处理
4.1 样品的收集
样品可以是家蚕的组织、血液、粪便等,收集时应注意避免污染。
4.2 样品的保存
样品应在-80℃以下保存,避免反复冻融。
5.核酸提取
5.1 核酸提取试剂盒的选择
可以选择商用的核酸提取试剂盒,也可以自制试剂进行核酸提取。
5.2 核酸提取方法
根据所选试剂盒的说明书进行核酸提取。
6.PCR反应体系
6.1 PCR反应体系的组成
PCR反应体系包括PCR反应缓冲液、酶、引物、荧光探针等。
6.2 PCR反应体系的制备
根据所选试剂盒的说明书进行PCR反应体系的制备。
7.荧光定量PCR反应程序
7.1 PCR反应程序
PCR反应程序包括预变性、变性、退火、延伸等步骤。
7.2 荧光定量PCR反应程序
荧光定量PCR反应程序包括荧光定量PCR反应体系的制备、PCR反应程序的设置等。
8.结果判定
8.1 结果判定标准
根据荧光定量PCR反应的荧光信号大小,判断样品中是否存在家蚕核型多角体病毒。
8.2 结果判定方法
根据所选试剂盒的说明书进行结果判定。
相关标准:
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质规格和检验方法
GB/T 14233.1-2008 电子产品可靠性试验 第1部分:通用试验方法
GB/T 14233.2-2005 电子产品可靠性试验 第2部分:试验B:借助于试验设备的试验
GB/T 14233.3-2005 电子产品可靠性试验 第3部分:试验Ca:可靠性试验的基本程序和方法
GB/T 14233.4-2005 电子产品可靠性试验 第4部分:试验Db:试验的方法和程序