NY/T 3436-2019
柑橘属品种鉴定 SSR分子标记法
发布时间:2019-01-17 实施时间:2019-09-01
柑橘属是重要的果树之一,其品种繁多,品质优良,具有广泛的经济价值。然而,由于柑橘属品种间的遗传差异较小,传统的形态学鉴定方法存在一定的局限性。因此,利用分子标记技术进行柑橘属品种鉴定具有重要的意义。
SSR(Simple Sequence Repeat)是一种广泛应用于分子生物学研究中的分子标记技术,其具有高度多态性、稳定性和可重复性等优点。因此,本标准采用SSR分子标记技术进行柑橘属品种鉴定。
1. 样品采集
样品采集应选择健康、生长良好的柑橘属植株,采集新鲜叶片或嫩枝,避免受到病虫害的影响。采集的样品应立即放入干燥的密闭袋中,标注样品编号、采集时间和采集地点等信息。
2. DNA提取
样品采集后,应立即进行DNA提取。本标准推荐使用CTAB法进行DNA提取。提取的DNA应经过质量检测,确保其完整性和纯度。
3. PCR扩增
本标准选用了10对SSR引物进行PCR扩增,具体引物序列详见附录A。PCR反应体系和反应条件详见附录B。PCR扩增后,应进行电泳检测,检测结果应记录并保存。
4. 电泳分析
PCR扩增产物经过电泳分析后,应根据引物的特异性和扩增产物的大小,进行品种鉴定。电泳分析结果应记录并保存。
相关标准
GB/T 20481-2006 植物遗传资源采集规范
GB/T 20482-2006 植物遗传资源DNA提取规范
GB/T 20483-2006 植物遗传资源分子标记技术规范
GB/T 20484-2006 植物遗传资源分子标记数据分析规范
GB/T 20485-2006 植物遗传资源分子标记数据共享规范