结球甘蓝是十字花科蔬菜中的一种重要作物，具有高营养价值和经济价值。为了保护和利用结球甘蓝的遗传资源，需要对其进行品种鉴定和遗传多样性研究。SSR分子标记法是一种常用的分子标记技术，具有高度多态性、重复性好、易扩增等优点，被广泛应用于植物遗传多样性研究和品种鉴定中。

1. 适用范围
本标准适用于结球甘蓝品种鉴定和遗传多样性研究。

2. 样品采集
样品采集应选择健康、生长良好的结球甘蓝植株，采集新鲜叶片，避免叶片老化和病虫害的影响。采集的样品应立即放入液氮中保存，或者在-80℃的冰箱中保存。

3. DNA提取
DNA提取应选择适当的提取方法，如CTAB法、酚/氯仿法等。提取的DNA应经过质量检测，确保DNA的完整性和纯度。

4. PCR扩增
PCR扩增应选择适当的引物，如已知的SSR引物或者通过序列比对设计的新引物。PCR反应体系应根据引物的特性进行优化，包括引物浓度、模板DNA浓度、MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶浓度等。PCR反应条件应根据引物的特性进行优化，包括退火温度、退火时间、延伸时间等。

5. 电泳分离
PCR扩增产物应进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，根据扩增产物的大小选择适当的电泳条件。电泳分离后，应用银染或荧光染色进行可视化。

6. 数据分析
电泳图像应进行图像处理，包括背景去除、峰识别、峰定量等。根据扩增产物的大小和数量，计算出每个样品的遗传距离和遗传相似度。根据遗传距离和遗传相似度，进行聚类分析和主成分分析，得出结球甘蓝品种的遗传关系和遗传多样性。

相关标准
GB/T 20481-2006 植物遗传多样性研究技术规范
NY/T 2472-2013 西兰花品种鉴定技术规程 SSR分子标记法
NY/T 2474-2013 芥菜品种鉴定技术规程 SSR分子标记法
NY/T 2475-2013 大白菜品种鉴定技术规程 SSR分子标记法
NY/T 2476-2013 花椰菜品种鉴定技术规程 SSR分子标记法