NY/T 2474-2013
黄瓜品种鉴定技术规程 SSR分子标记法
发布时间:2013-12-12 实施时间:2014-04-01


黄瓜是一种重要的蔬菜作物,其品种繁多,形态差异较大,品质特点各异。为了保证黄瓜品种的真实性和准确性,需要进行品种鉴定。SSR分子标记法是一种常用的分子生物学技术,可以通过分析黄瓜DNA序列的差异,快速准确地鉴定黄瓜品种。

1. 样品采集
样品采集应选择黄瓜植株的新鲜叶片或嫩茎,避免采集老化或受伤的组织。采集后应立即放入液氮中保存,或在-80℃的冰箱中保存。

2. DNA提取
DNA提取应根据样品的不同特点选择不同的提取方法。常用的提取方法包括CTAB法、酚/氯仿法、商用DNA提取试剂盒等。提取后的DNA应经过质量检测,确保DNA的完整性和纯度。

3. PCR扩增
PCR扩增是SSR分子标记法的核心步骤。应根据不同的引物序列选择不同的PCR反应体系和条件。PCR反应体系包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq酶、缓冲液等。PCR反应条件包括温度、时间、循环次数等。扩增后的产物应经过电泳检测,确定扩增效果。

4. 电泳分析
电泳分析是SSR分子标记法的最后一步。应根据扩增产物的大小选择不同的电泳条件。电泳条件包括电泳缓冲液、电泳电压、电泳时间等。电泳分析后,应根据扩增产物的大小和带型图,确定黄瓜品种的鉴定结果。

相关标准:
GB/T 20481-2006 蔬菜种子品质检验规程
GB/T 20482-2006 蔬菜种子品种鉴定规程
GB/T 20483-2006 蔬菜种子品种纯度检验规程
GB/T 20484-2006 蔬菜种子品种杂质检验规程
GB/T 20485-2006 蔬菜种子品种纯度鉴定规程