兔病毒性出血病是一种由兔病毒引起的急性传染病,主要表现为出血、发热、呼吸困难等症状。该病毒对人无致病性,但对兔子、猫、狗等动物却具有很强的致病性。为了及时发现和控制该病,需要对其进行检测。本标准规定了兔病毒性出血病血凝和血凝抑制试验方法,以供相关单位和个人参考。
1. 试验原理
本试验采用血凝和血凝抑制试验,通过检测兔病毒性出血病患者血清中的抗体水平,来判断是否感染该病毒。
2. 试验方法
2.1 血凝试验
2.1.1 试验材料
(1)兔病毒性出血病抗原
(2)兔病毒性出血病患者血清
(3)正常兔血清
(4)生理盐水
(5)96孔板
2.1.2 试验步骤
(1)将96孔板标号,分别加入兔病毒性出血病抗原、兔病毒性出血病患者血清、正常兔血清和生理盐水。
(2)将兔病毒性出血病患者血清、正常兔血清和生理盐水分别加入96孔板中,每孔加入50μl。
(3)将兔病毒性出血病抗原加入96孔板中,每孔加入50μl。
(4)在37℃下孵育2小时,观察是否出现凝集现象。
2.2 血凝抑制试验
2.2.1 试验材料
(1)兔病毒性出血病抗原
(2)兔病毒性出血病患者血清
(3)正常兔血清
(4)生理盐水
(5)96孔板
2.2.2 试验步骤
(1)将96孔板标号,分别加入兔病毒性出血病抗原、兔病毒性出血病患者血清、正常兔血清和生理盐水。
(2)将兔病毒性出血病患者血清、正常兔血清和生理盐水分别加入96孔板中,每孔加入50μl。
(3)将兔病毒性出血病抗原加入96孔板中,每孔加入50μl。
(4)将兔病毒性出血病患者血清和正常兔血清分别加入96孔板中,每孔加入50μl。
(5)在37℃下孵育2小时,观察是否出现凝集现象。
3. 结果判定
3.1 血凝试验
(1)兔病毒性出血病患者血清与兔病毒性出血病抗原凝集,且正常兔血清和生理盐水不凝集,说明兔病毒性出血病患者血清中存在抗体。
(2)兔病毒性出血病患者血清与正常兔血清和生理盐水均不凝集,说明正常兔血清和生理盐水中不存在抗体。
3.2 血凝抑制试验
(1)兔病毒性出血病患者血清与兔病毒性出血病抗原凝集,且正常兔血清和生理盐水不凝集,说明兔病毒性出血病患者血清中存在抗体。
(2)兔病毒性出血病患者血清与正常兔血清和生理盐水均不凝集,说明正常兔血清和生理盐水中不存在抗体。
相关标准
GB/T 22470-2008 动物实验室生物安全规范
GB/T 22471-2008 动物实验室生物安全管理规范
GB/T 22472-2008 动物实验室生物安全检测规范
GB/T 22473-2008 动物实验室生物安全评价规范
GB/T 22474-2008 动物实验室生物安全应急预案规范