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橡胶树棒孢霉落叶病是由棒孢霉属真菌引起的一种病害，主要危害橡胶树的叶片和嫩枝，严重影响橡胶树的生长和产量。为了及时、准确地检测橡胶树棒孢霉落叶病病原菌，保障橡胶产业的健康发展，制定了本标准。

1.范围
本标准适用于橡胶树棒孢霉落叶病病原菌分子检测的方法和要求。

2.术语和定义
2.1 棒孢霉落叶病病原菌：指引起橡胶树棒孢霉落叶病的真菌。
2.2 PCR扩增：聚合酶链式反应，是一种体外人工合成DNA的技术。
2.3 DNA提取：从样品中提取DNA的过程。
2.4 阳性对照：已知含有目标基因的DNA样品，用于验证PCR扩增反应的可靠性。
2.5 阴性对照：不含目标基因的DNA样品，用于排除假阳性结果。

3.样品采集
3.1 样品的选择
选择叶片、嫩枝等植物组织作为样品，应选择病叶或病枝，避免选择健康组织。
3.2 样品的采集
采用无菌器具采集样品，避免污染。将样品放入离心管中，标明采样时间、地点和样品编号。

4.DNA提取
4.1 样品处理
将样品切碎，加入适量的提取液，研磨均匀后离心，取上清液。
4.2 DNA提取
按照提取试剂盒说明书进行操作，提取样品中的DNA。

5.PCR扩增
5.1 扩增反应体系
按照试剂盒说明书配置PCR反应体系，包括模板DNA、引物、酶、缓冲液等。
5.2 扩增程序
按照试剂盒说明书进行PCR扩增，包括预变性、变性、退火、延伸等步骤。
5.3 阳性对照和阴性对照
每次PCR扩增反应中应包括阳性对照和阴性对照，以验证扩增反应的可靠性。

6.结果分析
6.1 扩增产物检测
将PCR扩增产物进行凝胶电泳，观察扩增产物的大小和数量。
6.2 结果判定
根据扩增产物的大小和数量，判断样品中是否存在棒孢霉落叶病病原菌。

相关标准：
GB/T 23538-2009 植物病原真菌检疫鉴定方法
GB/T 23539-2009 植物病原真菌检疫鉴定技术规范
GB/T 23540-2009 植物病原真菌检疫鉴定质量控制
GB/T 23541-2009 植物病原真菌检疫鉴定实验室管理规范
GB/T 23542-2009 植物病原真菌检疫鉴定报告编写规范