牧草是畜牧业中重要的饲料资源，其中含有多种生物碱，如莨菪烷生物碱、吡咯烷生物碱等。这些生物碱对于畜牧业的发展具有重要的意义，但同时也会对畜禽的健康产生影响。因此，对于牧草中生物碱的测定具有重要的意义。

本标准采用液相色谱-串联质谱法进行测定，该方法具有灵敏度高、准确性好、重现性高等优点。具体操作步骤如下：

1. 样品的制备
将牧草样品粉碎并过筛，取1g样品加入50mL离子交换水中，超声处理30min，离心10min，取上清液过滤，取滤液10mL加入10mL甲醇中，超声处理10min，离心10min，取上清液过滤，即为待测样品。

2. 标准曲线的制备
取15种生物碱的标准品，分别加入甲醇中制备浓度为0.1mg/mL的标准溶液，再将标准溶液按照一定比例混合，制备出不同浓度的混合标准溶液，用该溶液制备标准曲线。

3. 液相色谱-串联质谱测定
将待测样品和标准溶液注入液相色谱-串联质谱仪中，进行测定。测定条件如下：色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水（含0.1%甲酸），梯度洗脱，流速为0.3mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL。串联质谱采用电喷雾离子源，正离子模式下进行测定。

4. 数据处理
根据标准曲线计算出待测样品中各种生物碱的含量。

相关标准
GB/T 5009.124-2017 食品中生物碱的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.125-2017 食品中生物碱的测定 气相色谱法
GB/T 5009.126-2017 食品中生物碱的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.127-2017 食品中生物碱的测定 液相色谱-紫外检测法
GB/T 5009.128-2017 食品中生物碱的测定 液相色谱-荧光检测法