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一、范围
本标准适用于稻米及制品中抗性淀粉的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室水和气的制备纯化方法
GB/T 6688 粮食、油脂及其制品中脂肪酸甲酯的测定 气相色谱法
GB/T 6689 粮食、油脂及其制品中脂肪酸甲酯的测定 液相色谱法
GB/T 9695 粮食及其制品中脂肪酸的测定 气相色谱法
GB/T 15683 粮食及其制品中脂肪酸的测定 液相色谱法

三、原理
样品经酶解后，抗性淀粉转化为葡萄糖，再经酸性条件下，葡萄糖与3,5-二硝基水杨酸反应生成黄色化合物，其吸光度与抗性淀粉的含量成正比。

四、仪器设备
分光光度计：波长范围为400~700 nm，分辨率为1 nm。
恒温水浴器：温度范围为37℃±0.5℃。

五、试剂和材料
5%硫酸：用硫酸和蒸馏水配制。
淀粉酶：活力为10 U/mg。
3,5-二硝基水杨酸：纯度为99%。
乙醇：纯度为95%。
蒸馏水：用于制备试剂和样品溶液。
标准物质：抗性淀粉标准物质。

六、样品的制备
将样品粉碎，筛选出40目的粉末，称取0.5 g，加入50 mL蒸馏水，用恒温水浴器加热至80℃，保持10 min，冷却至室温，离心10 min，取上清液备用。

七、操作步骤
1.制备标准曲线
取抗性淀粉标准物质0.1 g，加入50 mL蒸馏水，用恒温水浴器加热至80℃，保持10 min，冷却至室温，离心10 min，取上清液，用蒸馏水稀释至100 mL，得到100 mg/L的抗性淀粉标准溶液。
取0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL和1.0 mL抗性淀粉标准溶液，分别加入试管中，加入5 mL淀粉酶，用恒温水浴器恒温37℃，酶解30 min，加入5 mL5%硫酸，用恒温水浴器恒温100℃，保持10 min，冷却至室温，用蒸馏水稀释至10 mL，得到不同浓度的标准曲线溶液。
在分光光度计上设置波长为510 nm，以蒸馏水为对照，测定各标准曲线溶液的吸光度，绘制标准曲线。

2.样品测定
取样品上清液0.5 mL，加入试管中，加入5 mL淀粉酶，用恒温水浴器恒温37℃，酶解30 min，加入5 mL5%硫酸，用恒温水浴器恒温100℃，保持10 min，冷却至室温，用蒸馏水稀释至10 mL，测定吸光度。

八、计算
用标准曲线法计算抗性淀粉的含量。

九、结果表示
抗性淀粉的含量，保留两位小数，单位为g/100g。

十、精密度和准确度
在相同条件下，重复测定5次，相对标准偏差不大于5%。

相关标准：
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GB/T 5502 粮食品质分析方法 粘性米的加工品质指标的测定