黄曲霉毒素B1是一种常见的饲料中的真菌毒素,对动物健康有很大的危害。因此,对饲料中黄曲霉毒素B1的测定非常重要。本标准采用胶体金法进行测定,具有灵敏度高、准确性好、操作简便等优点。
1. 范围
本标准适用于饲料中黄曲霉毒素B1的测定。
2. 原理
将样品中的黄曲霉毒素B1与特异性结合的抗体结合,再加入胶体金标记的抗体,形成复合物。复合物在盐酸的作用下,胶体金颗粒聚集,形成红色沉淀。通过比色法测定沉淀的光密度,即可计算出样品中黄曲霉毒素B1的含量。
3. 试剂和仪器
3.1 试剂
(1)黄曲霉毒素B1抗体
(2)胶体金标记的抗体
(3)盐酸
(4)PBS缓冲液
(5)BSA
(6)Tween-20
(7)样品
3.2 仪器
(1)分光光度计
(2)离心机
(3)pH计
4. 操作步骤
4.1 样品制备
将样品加入PBS缓冲液中,振荡混合,离心去除杂质,取上清液进行测定。
4.2 标准曲线制备
将黄曲霉毒素B1标准品按照不同浓度加入PBS缓冲液中,加入黄曲霉毒素B1抗体和胶体金标记的抗体,形成复合物。加入盐酸使胶体金颗粒聚集,形成红色沉淀。通过分光光度计测定沉淀的光密度,制作标准曲线。
4.3 测定样品
将样品加入黄曲霉毒素B1抗体和胶体金标记的抗体中,形成复合物。加入盐酸使胶体金颗粒聚集,形成红色沉淀。通过分光光度计测定沉淀的光密度,根据标准曲线计算出样品中黄曲霉毒素B1的含量。
5. 结果计算
样品中黄曲霉毒素B1的含量,按照标准曲线计算得出。
6. 精密度和准确度
本方法的精密度和准确度符合要求。
相关标准
GB/T 23594-2009 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 液相色谱法
GB/T 23595-2009 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 高效液相色谱法
GB/T 23596-2009 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 气相色谱法
GB/T 23597-2009 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法
GB/T 23598-2009 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 放射免疫法