NY/T 2377-2013
葡萄病毒检测技术规范
发布时间:2013-09-10 实施时间:2014-01-01


葡萄病毒是葡萄栽培中常见的病害之一,会导致葡萄产量下降、品质降低,严重时甚至会导致葡萄树死亡。因此,对葡萄病毒的检测十分重要。本标准旨在规范葡萄病毒检测技术,提高检测准确性和可靠性。

1.范围
本标准适用于葡萄病毒的检测。

2.术语和定义
2.1 葡萄病毒
指感染葡萄树的病毒。

2.2 样品
指用于葡萄病毒检测的葡萄组织或提取物。

2.3 提取
指从样品中提取葡萄病毒RNA或DNA的过程。

2.4 PCR
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),是一种体外扩增DNA的技术。

3.要求
3.1 样品采集
3.1.1 采集样品应选择病症明显的葡萄叶片或果实。
3.1.2 采集样品时应避免受到其他病原体的污染。
3.1.3 采集样品后应立即送至实验室进行处理。

3.2 提取
3.2.1 提取方法应选择适合的RNA或DNA提取试剂盒。
3.2.2 提取过程中应避免RNA或DNA的降解。
3.2.3 提取后的RNA或DNA应立即进行下一步的检测。

3.3 PCR检测
3.3.1 PCR反应体系应根据实验需要进行优化。
3.3.2 PCR反应应设置阳性对照和阴性对照。
3.3.3 PCR反应结果应进行准确的解读和分析。

4.方法
4.1 样品采集
4.1.1 采集葡萄叶片或果实样品。
4.1.2 将样品放入离心管中,加入适量的PBS缓冲液。
4.1.3 用超声波处理器处理样品,使其均匀分散。
4.1.4 离心样品,取上清液作为提取物。

4.2 提取
4.2.1 选择适合的RNA或DNA提取试剂盒。
4.2.2 按照试剂盒说明书进行提取。
4.2.3 提取后的RNA或DNA应进行浓度检测和质量检测。

4.3 PCR检测
4.3.1 根据实验需要设置PCR反应体系。
4.3.2 加入阳性对照和阴性对照。
4.3.3 进行PCR反应。
4.3.4 进行PCR产物的检测和分析。

相关标准
GB/T 28496-2012 葡萄病毒检测方法
GB/T 28497-2012 葡萄病毒检测试剂盒
GB/T 28498-2012 葡萄病毒检测设备
GB/T 28499-2012 葡萄病毒检测质量控制
GB/T 28500-2012 葡萄病毒检测结果判定