灵芝是一种常见的中药材，具有多种药理作用，如抗肿瘤、抗炎、抗氧化等。其中，灵芝酸是灵芝中的一种有效成分，具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等作用。因此，灵芝酸含量是衡量灵芝产品质量的重要指标之一。

本标准采用高效液相色谱法进行灵芝酸含量的测定。具体操作步骤如下：

1. 仪器和试剂
（1）高效液相色谱仪：采用反相色谱柱进行分离，检测波长为254 nm。
（2）色谱柱：C18色谱柱，5 μm，4.6 mm×250 mm。
（3）移液器、量筒、瓶塞、滤膜等。
（4）甲醇、乙腈、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、乙酸等试剂。

2. 样品制备
将灵芝产品粉末样品称取0.5 g，加入50 mL甲醇中，超声提取30 min，离心10 min，取上清液过滤，取10 mL上清液加入50 mL乙腈中，超声混合10 min，离心10 min，取上清液过滤，即为待测样品。

3. 色谱条件
流动相：甲醇-0.1%磷酸二氢钾溶液（30:70，V/V）。
流速：1.0 mL/min。
柱温：30℃。
进样量：10 μL。

4. 标准曲线的绘制
取不同浓度的灵芝酸标准品，分别进行高效液相色谱测定，绘制灵芝酸浓度与峰面积的标准曲线。

5. 样品测定
取待测样品10 μL，进行高效液相色谱测定，根据标准曲线计算灵芝酸的含量。

相关标准
GB/T 5009.124-2017 食品中灵芝酸的测定 高效液相色谱法
GB/T 22291-2008 中药材质量控制标准 灵芝
GB/T 18765-2015 中药材质量控制标准 灵芝孢子粉
GB/T 18766-2015 中药材质量控制标准 灵芝子实体
GB/T 18767-2015 中药材质量控制标准 灵芝菌丝体