菠萝凋萎病是由菠萝凋萎病菌引起的一种病害，严重影响了菠萝的产量和质量。为了及时发现和控制菠萝凋萎病的发生，需要对菠萝凋萎病菌进行检测。本标准旨在规范菠萝凋萎病病原分子检测技术，确保检测结果准确可靠。

1.范围
本标准适用于菠萝凋萎病病原分子检测，包括样品采集、提取、检测等环节。

2.术语和定义
2.1 菠萝凋萎病菌
指引起菠萝凋萎病的病原菌，主要包括Ralstonia solanacearum和Ralstonia pseudosolanacearum。

2.2 样品
指从菠萝植株、土壤、水源等采集的样品。

2.3 提取
指从样品中提取菠萝凋萎病菌的DNA或RNA。

2.4 PCR
聚合酶链式反应，是一种体外扩增DNA的技术。

2.5 实时荧光定量PCR
一种基于PCR技术的定量检测方法，可以实现对PCR反应过程的实时监测。

3.要求
3.1 样品采集
3.1.1 样品应从疑似菠萝凋萎病病株或病害部位采集，避免采集健康部位的样品。
3.1.2 样品应在采集后尽快送至实验室进行处理。

3.2 提取
3.2.1 提取方法应选择适合的DNA或RNA提取试剂盒。
3.2.2 提取过程中应注意避免污染和交叉污染。

3.3 PCR检测
3.3.1 PCR反应体系应根据实验需要进行优化。
3.3.2 PCR反应条件应根据实验需要进行优化。
3.3.3 PCR反应过程中应注意避免污染和交叉污染。
3.3.4 PCR反应后应进行凝胶电泳或实时荧光定量PCR检测。

4.方法
4.1 样品采集
4.1.1 从疑似菠萝凋萎病病株或病害部位采集样品。
4.1.2 样品应在采集后尽快送至实验室进行处理。

4.2 提取
4.2.1 根据实验需要选择适合的DNA或RNA提取试剂盒。
4.2.2 按照试剂盒说明书进行提取。
4.2.3 提取后的DNA或RNA应进行质量检测。

4.3 PCR检测
4.3.1 根据实验需要选择适合的引物和探针。
4.3.2 根据实验需要优化PCR反应体系和条件。
4.3.3 进行PCR反应。
4.3.4 PCR反应后进行凝胶电泳或实时荧光定量PCR检测。

相关标准
GB/T 31650-2019 菠萝凋萎病检疫处理技术规范
NY/T 2248-2012 菠萝凋萎病病原检测技术规范
GB/T 31649-2019 菠萝凋萎病检疫处理技术规范
GB/T 31648-2019 菠萝凋萎病检疫处理技术规范
GB/T 31647-2019 菠萝凋萎病检疫处理技术规范