一、范围
本标准规定了大豆及制品中磷脂组分和含量的测定方法，采用高效液相色谱法进行分析。该方法适用于大豆及其制品中磷脂组分和含量的测定。

二、引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
GB/T 5009.5-2016 食品中磷脂的测定
GB/T 5009.6-2016 食品中磷脂酰胆碱的测定
GB/T 5009.7-2016 食品中磷脂酰乙醇胺的测定
GB/T 5009.8-2016 食品中磷脂酰肌醇的测定

三、仪器和设备
1. 高效液相色谱仪：采用反相色谱柱，检测器为紫外检测器。
2. 电子天平：分辨率为0.1mg。
3. 超声清洗器：功率为100W。

四、试剂和材料
1. 氯仿：色谱纯。
2. 甲醇：色谱纯。
3. 乙醇：色谱纯。
4. 水：去离子水。
5. 磷脂标准品：磷脂标准品应为纯品，供应商为国内外知名厂家。
6. 大豆及其制品样品：样品应为新鲜、干燥、无异味、无污染的样品。

五、样品的制备
1. 大豆及其制品样品的制备：将样品研磨成粉末，过筛后取适量样品称重，加入氯仿：甲醇（2:1，v/v）混合液中，超声提取30min，离心分离，取上清液，加入水使其达到一定的体积，混匀备用。
2. 磷脂标准品的制备：将磷脂标准品称重，加入氯仿：甲醇（2:1，v/v）混合液中，超声提取30min，离心分离，取上清液，加入水使其达到一定的体积，混匀备用。

六、操作步骤
1. 样品的进样：取适量样品进样，进样量为20μL。
2. 色谱条件：
（1）柱温：25℃；
（2）流动相：甲醇：水（60:40，v/v）；
（3）流速：1.0mL/min；
（4）检测波长：205nm。
3. 磷脂组分的定量：将磷脂标准品进样，测定其峰面积，绘制标准曲线。将样品进样，测定其峰面积，根据标准曲线计算出磷脂组分的含量。

七、结果的计算
1. 磷脂组分的含量计算公式：
含量（mg/g）=（样品峰面积/标准品峰面积）×标准品浓度×稀释倍数/样品质量
2. 结果的精度：相对标准偏差不大于5%。

八、质量控制
1. 样品的制备和分析应在同一实验室内进行。
2. 样品的制备和分析应按照标准操作规程进行。
3. 每个样品应进行两次测定，取平均值作为最终结果。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
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GB/T 5009.8-2016 食品中磷脂酰肌醇的测定