1.范围
本标准适用于谷物及其制品中β-葡聚糖含量的测定。

2.引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室水和气的纯度检验方法
GB/T 5497 谷物及其制品中淀粉含量的测定
GB/T 5498 谷物及其制品中总糖含量的测定
GB/T 5501 谷物及其制品中还原糖含量的测定
GB/T 5502 谷物及其制品中葡萄糖含量的测定

3.原理
样品经酸水解后，β-葡聚糖水解为葡萄糖，葡萄糖经酶法反应生成葡萄糖酸，葡萄糖酸与邻苯二酚反应生成紫色化合物，根据紫色化合物的吸光度测定β-葡聚糖含量。

4.仪器和设备
4.1 紫外分光光度计
4.2 恒温水浴器
4.3 离心机
4.4 电子天平
4.5 恒温振荡器

5.试剂和材料
5.1 氢氧化钠(NaOH)
5.2 硫酸(H2SO4)
5.3 邻苯二酚
5.4 葡萄糖酸脱氢酶
5.5 葡萄糖氧化酶
5.6 葡萄糖标准溶液
5.7 β-葡聚糖标准品
5.8 乙醇
5.9 硫酸钠(Na2SO4)
5.10 氯仿

6.样品的制备
6.1 谷物样品
将谷物样品磨成粉末，筛选过40目筛，密封保存。
6.2 谷物制品样品
将谷物制品样品磨成粉末，筛选过40目筛，密封保存。

7.操作步骤
7.1 样品的制备
取样品1g，加入50ml 1mol/L H2SO4，放入恒温水浴器中，水浴温度为100℃，加热2h，冷却至室温，加入50ml蒸馏水，离心10min，取上清液，加入50ml 1mol/L NaOH，调节pH至7.0，加入0.5ml葡萄糖酸脱氢酶，放入恒温振荡器中，温度为50℃，振荡1h，加入0.5ml葡萄糖氧化酶，继续振荡1h，加入50ml 95%乙醇，振荡10min，离心10min，取上清液，加入50ml氯仿，振荡10min，离心10min，取上清液，加入50ml氯仿，振荡10min，离心10min，取上清液，加入50ml氯仿，振荡10min，离心10min，取上清液，将氯仿层合并，加入少量硫酸钠，过滤，取滤液，蒸干，加入1ml 0.5%邻苯二酚乙醇溶液，加热至沸腾，冷却至室温，加入1ml 1mol/L NaOH，混匀，测定吸光度。

7.2 标准曲线的绘制
取β-葡聚糖标准品0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml，加入50ml 1mol/L H2SO4，按照7.1的方法进行操作，绘制标准曲线。

7.3 吸光度的测定
按照7.1的方法进行操作，测定吸光度。

8.计算
样品中β-葡聚糖的含量，按照标准曲线计算。

9.精密度和准确度
9.1 精密度
在同一实验室，同一仪器，同一操作人员的条件下，重复测定6次，计算相对标准偏差(RSD)。

9.2 准确度
在同一实验室，同一仪器，同一操作人员的条件下，测定β-葡聚糖标准品，计算回收率。

10.报告
报告样品中β-葡聚糖的含量，单位为mg/100g或mg/kg。

相关标准
GB/T 5497 谷物及其制品中淀粉含量的测定
GB/T 5498 谷物及其制品中总糖含量的测定
GB/T 5501 谷物及其制品中还原糖含量的测定
GB/T 5502 谷物及其制品中葡萄糖含量的测定
GB/T 5503 谷物及其制品中麦芽糖含量的测定