食用菌是一类重要的食用菌类别，其种类繁多，但是在市场上常常出现假冒伪劣的情况。因此，对食用菌菌种真实性的鉴定显得尤为重要。传统的鉴定方法主要依靠形态学和生理学特征，但是这些方法存在着主观性和不确定性。随着分子生物学技术的发展，分子生物学方法逐渐成为食用菌菌种真实性鉴定的重要手段之一。

ISSR（Inter-Simple Sequence Repeat）是一种基于PCR扩增的分子标记技术，其原理是利用两个相邻的微卫星序列之间的单核苷酸多态性，通过PCR扩增产生多态性DNA片段。ISSR法具有高度的多态性和重复性，可以用于食用菌菌种真实性鉴定。

本标准规定了食用菌菌种真实性鉴定的ISSR法，具体步骤如下：

1. 样品的采集：选择新鲜、健康、无病虫害的食用菌菌株，采集菌丝体或子实体样品。

2. DNA提取：采用适当的DNA提取方法，提取样品中的总DNA。

3. ISSR扩增：根据ISSR引物序列设计引物，进行PCR扩增。PCR反应体系和条件根据实验需要进行优化。

4. 电泳分析：将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，根据PCR产物的大小和数量进行鉴定。

5. 数据处理：根据电泳图像，进行数据处理和分析，确定菌株的遗传多样性和亲缘关系。

本标准的实施可以提高食用菌菌种真实性鉴定的准确性和可靠性，对于保障食用菌的品质和安全具有重要意义。

相关标准
GB/T 18916.21-2002 食用菌品种鉴定方法 第21部分：ISSR分子标记法

GB/T 18916.22-2002 食用菌品种鉴定方法 第22部分：RAPD分子标记法

GB/T 18916.23-2002 食用菌品种鉴定方法 第23部分：AFLP分子标记法

GB/T 18916.24-2002 食用菌品种鉴定方法 第24部分：SSR分子标记法

GB/T 18916.25-2002 食用菌品种鉴定方法 第25部分：ITS序列分析法