大豆是一种常见的食品原料，其中含有丰富的异黄酮。异黄酮是一种天然的植物雌激素，具有多种生物活性，如抗氧化、抗癌、抗炎等作用。因此，对大豆中异黄酮含量的测定具有重要的意义。

本标准采用高效液相色谱法进行测定。具体操作步骤如下：

1. 样品制备

将大豆样品研磨成粉末，取1g样品加入50mL甲醇中，超声提取30min，离心10min，取上清液过滤，取10mL上清液加入10mL水中，用0.22μm滤膜过滤，即为待测样品。

2. 仪器设备

高效液相色谱仪、C18色谱柱、紫外检测器、移液器、量筒、瓶塞、注射器等。

3. 色谱条件

色谱柱：C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）

流动相：甲醇-水（含0.1%乙酸）（30:70）

流速：1.0mL/min

检测波长：254nm

进样量：20μL

4. 标准曲线的绘制

取不同浓度的异黄酮标准品，分别进行高效液相色谱测定，绘制标准曲线。

5. 样品测定

将待测样品进样，进行高效液相色谱测定，根据标准曲线计算出样品中异黄酮的含量。

相关标准
GB/T 5009.5-2016 食品中异黄酮的测定 高效液相色谱法

GB/T 8313-2018 大豆异黄酮提取物

GB/T 22422-2008 大豆异黄酮含量的测定

GB/T 22423-2008 大豆异黄酮提取物的质量控制

GB/T 22424-2008 大豆异黄酮提取物的规格