一、范围
本标准规定了蔬菜水果中多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮等4种苯并咪唑类农药残留量的测定方法。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格
GB/T 8170 数字表示法和圆整规则
GB/T 13610 化学试剂通用规定
GB/T 15240-2003 食品中农药残留量的测定 气相色谱法
GB/T 19191-2008 食品中多种农药残留量的测定 高效液相色谱-质谱/质谱法

三、原理
样品经乙腈提取，经硅胶小柱净化后，用高效液相色谱法进行测定。

四、仪器设备和试剂
4.1 仪器设备
高效液相色谱仪：采用二元高压梯度泵、自动进样器、紫外检测器等。
色谱柱：C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）。
pH计：0~14 pH。
电子天平：0.1 mg。
超声波清洗器：功率大于200 W。
4.2 试剂
乙腈：色谱纯。
硅胶：40~63 μm。
多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮标准品：纯度大于98%。

五、样品的处理
5.1 样品的采集
样品应当随机采集，避免受到污染和损伤。样品应当在采集后尽快送检。
5.2 样品的制备
样品去皮、去核、去污染物，然后切碎，混匀，取适量样品称重，加入适量水，经超声波清洗器清洗，离心，取上清液，加入乙腈，振荡混合，离心，取上清液，经硅胶小柱净化，用乙腈洗脱，收集洗脱液，旋干，加入乙腈溶解，即为样品溶液。

六、操作步骤
6.1 仪器条件
流动相：甲醇-水（70:30）。
流速：1.0 mL/min。
柱温：30℃。
检测波长：多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮分别为220 nm、278 nm、280 nm和290 nm。
进样量：20 μL。
6.2 标准曲线的绘制
取多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮标准品各6个不同浓度的溶液，分别加入样品溶液中，进行测定，绘制标准曲线。
6.3 样品的测定
取样品溶液20 μL，进行测定，根据标准曲线计算样品中多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮的含量。

七、计算
样品中多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮的含量分别按下式计算：
C=（A×V×D）/（ε×m）
式中：
C——样品中多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮的含量，mg/kg；
A——样品中多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮的峰面积；
V——取样体积，mL；
D——稀释倍数；
ε——多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮的摩尔吸光系数，分别为1.2×10^4、1.2×10^4、1.1×10^4和1.1×10^4 L/(mol·cm)；
m——样品质量，g。

八、结果表示
结果保留两位小数，单位为mg/kg。

九、质量控制
9.1 标准品的制备
取多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮标准品，分别加入适量水，制备出100 mg/L的标准溶液。
9.2 标准品的测定
取多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮标准品各6个不同浓度的溶液，分别加入样品溶液中，进行测定，绘制标准曲线。
9.3 质量控制样品的制备
取蔬菜水果样品，加入适量多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮标准品，制备出含量为0.1、0.5和1.0 mg/kg的质量控制样品。
9.4 质量控制样品的测定
对质量控制样品进行测定，结果应当在规定范围内。

十、分析报告
分析报告应当包括以下内容：
样品名称、编号、采样日期、检测日期、检测方法、检测结果、检测限、质量控制结果等。

相关标准
GB/T 15240-2003 食品中农药残留量的测定 气相色谱法
GB/T 19191-2008 食品中多种农药残留量的测定 高效液相色谱-质谱/质谱法
GB/T 5009.199-2017 食品中多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.212-2017 食品中多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮残留量的测定 气相色谱-质谱法
GB/T 5009.215-2017 食品中多菌灵、环丙沙星、环氧菌素和环唑酮残留量的测定 高效液相色谱法