一、范围
本标准适用于饲料中氟哌酸的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格
GB/T 6688 分析化学实验室通用规定
GB/T 8170 数字表示法和圆整规则
GB/T 14633 化学试剂 包装、标志、运输及贮存
NY/T 1420 饲料中氟离子的测定 离子选择电极法
NY/T 1421 饲料中氟离子的测定 氟化铝-光度法

三、原理
样品经提取、净化后，采用高效液相色谱法进行测定。样品中的氟哌酸在特定条件下与荧光标记试剂反应生成荧光化合物，荧光强度与氟哌酸的浓度成正比。

四、仪器设备和试剂
4.1 仪器设备
高效液相色谱仪：包括泵、进样器、柱温箱、检测器等。
色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
pH计：0-14pH。
电子天平：分辨率0.1mg。
超声波清洗器：功率300W，频率40kHz。
4.2 试剂
氟哌酸标准品：纯度≥98%。
甲醇：色谱纯。
乙腈：色谱纯。
磷酸二氢钾：分析纯。
荧光标记试剂：荧光试剂I、荧光试剂II。

五、样品处理
5.1 取样
按照GB/T 6682的规定取样。
5.2 样品制备
将样品粉碎，混匀后取适量样品，加入磷酸二氢钾溶液，超声处理，离心，取上清液，过滤，即得样品溶液。

六、操作步骤
6.1 仪器条件设置
6.2 样品进样
6.3 色谱条件
6.4 荧光检测器条件
6.5 标准曲线的绘制
6.6 样品测定

七、计算
计算公式：
C=（A-B）/a
式中：
C——样品中氟哌酸的质量浓度，mg/kg；
A——样品荧光峰面积；
B——空白荧光峰面积；
a——氟哌酸标准品的荧光峰面积与质量浓度的比值，mg/L。

八、结果表示
保留两位小数，单位为mg/kg。

九、质量保证和质量控制
9.1 仪器的校准和检验
9.2 样品的制备和处理
9.3 质量控制
9.4 空白对照

十、检验结果的评定
10.1 检验结果的计算
10.2 检验结果的判定

相关标准
NY/T 1420 饲料中氟离子的测定 离子选择电极法
NY/T 1421 饲料中氟离子的测定 氟化铝-光度法
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