一、范围
本标准适用于油菜籽中叶绿素含量的测定。

二、引用标准
GB/T 601-2002 化学试剂 化学分析用试剂的制备
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
GB/T 8170-2008 数字表示法和圆整规则
GB/T 13610-1992 分析化学实验室用玻璃仪器通用技术条件
GB/T 20042-2005 油菜籽油品质的测定

三、原理
将油菜籽样品经过提取、过滤、稀释后，用分光光度计测定其吸光度，根据标准曲线计算出叶绿素含量。

四、仪器和设备
1.分光光度计：量程为0-2.5A，波长范围为400-700nm。
2.恒温水浴器：温度范围为20-25℃。
3.振荡器：振幅为1.5cm，频率为120次/分钟。
4.离心机：最高转速为3000r/min。

五、试剂和材料
1.乙醇：纯度为95%。
2.乙醚：纯度为95%。
3.丙酮：纯度为95%。
4.无水乙醇：纯度为95%。
5.叶绿素标准品：纯度为98%。
6.油菜籽样品：经过破碎、筛选、干燥后制成的粉末状样品。

六、操作步骤
1.样品制备
取适量油菜籽样品，研磨成细粉末，称取0.5g样品，加入10ml乙醇，振荡30分钟，离心5分钟，取上清液，加入10ml乙醚，振荡30分钟，离心5分钟，取上清液，加入10ml丙酮，振荡30分钟，离心5分钟，取上清液，加入无水乙醇稀释至50ml，即为样品液。
2.制备标准曲线
取叶绿素标准品，加入无水乙醇稀释成不同浓度的标准溶液，分别测定其吸光度，绘制标准曲线。
3.测定样品吸光度
取适量样品液，用分光光度计测定其吸光度，根据标准曲线计算出叶绿素含量。

七、计算
样品中叶绿素含量的计算公式为：
C=(A-B)/K
其中，C为叶绿素含量，单位为mg/kg；
A为样品吸光度；
B为空白吸光度；
K为标准曲线斜率。

八、结果表示
保留两位小数，单位为mg/kg。

九、精密度和准确度
本方法的精密度和准确度参照GB/T 601-2002和GB/T 6682-2008。

相关标准
GB/T 601-2002 化学试剂 化学分析用试剂的制备
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
GB/T 8170-2008 数字表示法和圆整规则
GB/T 13610-1992 分析化学实验室用玻璃仪器通用技术条件
GB/T 20042-2005 油菜籽油品质的测定