荞麦是一种常见的粮食作物，含有丰富的黄酮类化合物，具有多种保健功效。为了保证荞麦及其制品的质量，需要对其总黄酮含量进行测定。本标准就是为了规范荞麦及其制品中总黄酮含量的测定方法。

1. 范围
本标准适用于荞麦及其制品中总黄酮含量的测定。

2. 原理
将荞麦及其制品样品经过提取、分离、纯化后，用高效液相色谱法（HPLC）测定总黄酮含量。

3. 仪器和设备
3.1 高效液相色谱仪
3.2 恒温振荡器
3.3 离心机
3.4 超声波清洗器
3.5 电子天平
3.6 称量瓶
3.7 注射器
3.8 过滤器

4. 试剂和材料
4.1 甲醇
4.2 乙腈
4.3 纯水
4.4 乙酸
4.5 氢氧化钠
4.6 氯仿
4.7 硫酸
4.8 氨水
4.9 荞麦及其制品样品

5. 样品的制备
5.1 荞麦及其制品样品的制备应符合GB/T 5490的规定。
5.2 样品的制备应避免阳光直射和高温。

6. 操作步骤
6.1 样品的提取
将样品称量0.5g，加入50mL甲醇，用恒温振荡器振荡提取2h，离心10min，取上清液过滤，取10mL上清液加入10mL乙腈，用超声波清洗器清洗10min，离心10min，取上清液过滤，即为待测样品。

6.2 样品的分离
将待测样品注入高效液相色谱仪，采用C18色谱柱，流动相为乙腈-水-乙酸（25:75:0.1），流速为1.0mL/min，检测波长为365nm，进样量为20μL，进行分离。

6.3 样品的测定
将分离后的样品注入高效液相色谱仪，采用C18色谱柱，流动相为乙腈-水-乙酸（25:75:0.1），流速为1.0mL/min，检测波长为365nm，进样量为20μL，进行测定。

7. 计算
用荞麦及其制品样品的总黄酮含量标准曲线计算待测样品的总黄酮含量。

8. 结果的表示
结果应按照mg/100g表示。

9. 精密度和准确度
9.1 精密度：同一实验室内，重复测定6次，相对标准偏差不应大于5%。
9.2 准确度：本方法的准确度应符合GB/T 5490的规定。

相关标准
GB/T 5490-2008 荞麦及其制品
GB/T 5009.177-2008 食品中总黄酮的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.229-2008 食品中黄酮类化合物的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.230-2008 食品中黄酮类化合物的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.235-2008 食品中黄酮类化合物的测定 气相色谱-质谱法