左旋咪唑是一种广泛应用于畜禽饲料中的抗生素，但其过量使用会对动物健康产生不良影响，因此需要对饲料中的左旋咪唑进行测定。本标准采用高效液相色谱法进行测定，具有灵敏度高、准确度高、重现性好等优点。

1. 原理
样品经提取后，采用高效液相色谱法进行分离，检测器检测左旋咪唑的峰面积，与标准曲线比较，计算出样品中左旋咪唑的含量。

2. 仪器和设备
2.1 高效液相色谱仪
2.2 色谱柱：C18色谱柱
2.3 称量仪
2.4 超声波清洗仪
2.5 离心机
2.6 恒温水浴器
2.7 紫外可见分光光度计

3. 试剂和材料
3.1 左旋咪唑标准品
3.2 甲醇
3.3 磷酸二氢钾
3.4 乙腈
3.5 水
3.6 饲料样品

4. 操作步骤
4.1 样品制备
取适量饲料样品，粉碎后称取1g，加入50ml甲醇中，超声波清洗10min，离心10min，取上清液过滤，取1ml过滤液加入10ml甲醇中，超声波清洗10min，离心10min，取上清液过滤，即为样品提取液。
4.2 标准曲线制备
取左旋咪唑标准品，加入甲醇中制备1mg/ml的标准溶液，再取不同浓度的标准溶液，分别加入甲醇中制备不同浓度的标准曲线。
4.3 色谱条件
色谱柱：C18色谱柱
流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾（30:70）
流速：1.0ml/min
检测波长：290nm
进样量：20μl
柱温：30℃
4.4 样品测定
取适量样品提取液，加入乙腈中制备1mg/ml的样品溶液，进样后进行高效液相色谱分析，记录左旋咪唑的峰面积，与标准曲线比较，计算出样品中左旋咪唑的含量。

5. 结果计算
样品中左旋咪唑的含量（mg/kg）=（样品中左旋咪唑的峰面积/标准曲线斜率）×进样量×稀释倍数

6. 精密度和准确度
6.1 精密度：同一样品进行6次测定，相对标准偏差不大于5%。
6.2 准确度：加标回收率在80%~120%之间。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范和评价标准
GB/T 5009.3-2016 食品中亚硝酸盐和亚硝胺的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.9-2016 食品中硝酸盐的测定 紫外分光光度法
GB/T 5009.11-2017 食品中总磷的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.12-2017 食品中总氮的测定 气相色谱法