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苯乙醇胺A是一种常见的饲料添加剂，用于促进动物生长和增加肉质量。然而，苯乙醇胺A的过量使用会对动物健康造成危害，因此需要对饲料中苯乙醇胺A的含量进行测定。本标准采用高效液相色谱法进行测定，具有准确、快速、灵敏度高等优点。

1. 原理
样品经提取后，采用高效液相色谱法进行分离和检测。在特定的色谱条件下，苯乙醇胺A与内标物同时进入色谱柱，经过分离后进入检测器进行检测。根据内标物的峰面积比值计算出苯乙醇胺A的含量。

2. 仪器和设备
（1）高效液相色谱仪
（2）色谱柱：C18色谱柱
（3）移液器、量筒、瓶塞等实验室常用器具

3. 试剂和材料
（1）苯乙醇胺A标准品
（2）内标物标准品
（3）甲醇、乙腈、水等色谱纯试剂
（4）饲料样品

4. 操作步骤
（1）样品制备：取适量饲料样品，粉碎后称取1g，加入10mL甲醇，超声提取30min，离心后取上清液，过滤后取1mL加入10mL乙腈中，摇匀后离心，取上清液备用。
（2）色谱条件：
流动相：甲醇-水（含0.1%甲酸）（70:30，v/v）
流速：1.0 mL/min
柱温：30℃
检测波长：254 nm
进样量：10 μL
（3）标准曲线制备：取苯乙醇胺A标准品和内标物标准品，分别加入乙腈中制备不同浓度的标准溶液，进行色谱分析，绘制标准曲线。
（4）样品测定：将样品溶液进样进行色谱分析，根据标准曲线计算出苯乙醇胺A的含量。

5. 结果计算
苯乙醇胺A的含量（mg/kg）=（样品中苯乙醇胺A峰面积/内标物峰面积）×内标物加标量×稀释倍数×1000/样品质量

相关标准：
GB/T 6432-2018 饲料中苯乙醇胺A的测定 气相色谱法
GB/T 6433-2018 饲料中苯乙醇胺A的测定 高效液相色谱法
GB/T 6434-2018 饲料中苯乙醇胺A的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 6435-2018 饲料中苯乙醇胺A的测定 液相色谱-紫外检测法
GB/T 6436-2018 饲料中苯乙醇胺A的测定 液相色谱-荧光检测法