2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1,4-二氢吡啶是一种广泛存在于饲料中的抗生素，其在饲料中的含量对动物的健康和生长发育有着重要的影响。因此，对饲料中2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1,4-二氢吡啶的测定显得尤为重要。

本标准采用液相色谱-串联质谱法进行测定。具体操作步骤如下：

1. 样品的制备

将饲料样品粉碎并筛选，取约1g样品加入50mL离子交换水中，振荡混合10min，离心10min，取上清液过滤，取滤液1mL加入10mL离子交换水中，用0.22μm滤膜过滤，即为待测样品。

2. 标准曲线的制备

取2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1,4-二氢吡啶纯品，称取适量加入离子交换水中，制备出一系列不同浓度的标准溶液。

3. 液相色谱-串联质谱法测定

将待测样品和标准溶液分别注入液相色谱-串联质谱仪中，进行测定。测定条件如下：

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（2.1mm×50mm，1.8μm）

流动相：A相为0.1%甲酸水溶液，B相为乙腈

流速：0.3mL/min

柱温：40℃

质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子模式（M+H）+

4. 数据处理

根据测定结果，绘制出标准曲线，并计算出待测样品中2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-1,4-二氢吡啶的含量。

相关标准
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