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黑米花色苷是一种天然色素，具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种生物活性。因此，黑米花色苷在食品、保健品、药品等领域得到了广泛的应用。为了保证黑米花色苷的质量，需要对其进行测定。本标准介绍了一种高效液相色谱法测定黑米花色苷的方法。

1. 原理
黑米花色苷在高效液相色谱柱中与流动相发生相互作用，通过检测黑米花色苷在柱上的保留时间和峰面积，可以计算出黑米花色苷的含量。

2. 仪器和设备
（1）高效液相色谱仪
（2）色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm
（3）移液器、量筒、瓶塞、滤膜等

3. 试剂和材料
（1）黑米花色苷标准品
（2）甲醇
（3）去离子水

4. 操作步骤
（1）样品制备：将黑米样品磨成粉末，称取0.5g，加入10mL甲醇，超声处理30min，离心10min，取上清液过滤。
（2）色谱条件：
流动相：甲醇-去离子水（30:70）
流速：1.0mL/min
检测波长：530nm
柱温：25℃
进样量：10μL
（3）建立黑米花色苷标准曲线：取黑米花色苷标准品0.1mg/mL，稀释成不同浓度的标准溶液，分别进行测定，建立黑米花色苷标准曲线。
（4）样品测定：取经过处理的黑米样品，进行测定，计算出黑米花色苷的含量。

5. 结果计算
黑米花色苷的含量（mg/kg）=（样品峰面积/标准曲线斜率）×稀释倍数×1000/样品质量

6. 精密度和准确度
本方法的相对标准偏差（RSD）小于5%，回收率在95%~105%之间。

相关标准：
GB/T 5009.124-2017 食品中花色苷的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.28-2017 食品中总黄酮的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.266-2017 食品中花青素的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.267-2017 食品中类黄酮的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.268-2017 食品中类黄酮醇的测定 高效液相色谱法