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畜禽骨胶原蛋白是一种重要的蛋白质，广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。为了保证畜禽骨胶原蛋白的质量，需要对其含量进行测定。本标准规定了畜禽骨胶原蛋白含量的测定方法，采用分光光度法进行测定。

1.范围
本标准适用于畜禽骨胶原蛋白含量的测定。

2.仪器和设备
2.1 分光光度计：可测量280nm波长处的吸光度。
2.2 离心机：最高转速为10000r/min。
2.3 恒温水浴器：可控制温度在37℃±1℃。
2.4 紫外可见分光光度计：可测量280nm波长处的吸光度。

3.试剂和材料
3.1 氯化钠：AR级。
3.2 磷酸盐缓冲液：pH为7.4。
3.3 碳酸氢钠：AR级。
3.4 氢氧化钠：AR级。
3.5 畜禽骨胶原蛋白标准品：含量为1mg/mL。
3.6 蒸馏水：用于制备试剂和洗涤。

4.操作步骤
4.1 标准曲线的制备
4.1.1 取畜禽骨胶原蛋白标准品1mL，加入10mL的磷酸盐缓冲液，制备1mg/mL的畜禽骨胶原蛋白溶液。
4.1.2 取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL的畜禽骨胶原蛋白溶液，分别加入10mL的磷酸盐缓冲液，制备0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL的畜禽骨胶原蛋白溶液。
4.1.3 分别取上述不同浓度的畜禽骨胶原蛋白溶液1mL，加入10mL的磷酸盐缓冲液，制备不同浓度的畜禽骨胶原蛋白标准曲线。
4.2 样品的制备
4.2.1 取畜禽骨胶原蛋白样品1g，加入10mL的磷酸盐缓冲液，超声处理10min，离心10min，取上清液。
4.2.2 取上清液1mL，加入10mL的磷酸盐缓冲液，制备畜禽骨胶原蛋白样品溶液。
4.3 分光光度法测定
4.3.1 分别取畜禽骨胶原蛋白标准曲线和样品溶液各1mL，加入10mL的磷酸盐缓冲液，混匀。
4.3.2 分别在280nm处测量吸光度，记录吸光度值。
4.3.3 根据标准曲线计算样品中畜禽骨胶原蛋白的含量。

5.结果计算
5.1 标准曲线的绘制
将不同浓度的畜禽骨胶原蛋白标准溶液的吸光度值作为纵坐标，浓度值作为横坐标，绘制标准曲线。
5.2 样品的含量计算
根据样品的吸光度值和标准曲线计算样品中畜禽骨胶原蛋白的含量。

相关标准：
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