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马铃薯是我国重要的经济作物之一，但是马铃薯黑胫病和软腐病菌的发生严重影响了马铃薯的产量和质量。因此，对马铃薯黑胫病和软腐病菌进行快速、准确的检测具有重要意义。本标准旨在规范马铃薯黑胫病和软腐病菌的PCR检测方法，以提高检测的准确性和可靠性。

1.范围
本标准适用于马铃薯黑胫病和软腐病菌的PCR检测。

2.引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范与评价
GB/T 191-2008 包装、装运、储存标志和说明
GB/T 2828.1-2012 采样检验程序第1部分：按计划采样程序
GB/T 2829-2002 采样检验程序第2部分：抽样程序
GB/T 29415-2012 食品安全国家标准食品中基因改造成分检测方法 PCR法

3.术语和定义
3.1 马铃薯黑胫病：由病原菌普通黑胫病菌引起的马铃薯病害。
3.2 软腐病菌：引起马铃薯软腐病的病原菌。

4.样品处理
4.1 样品采集
采集样品时应避免样品受到污染，采集后应立即送检。
4.2 样品处理
样品处理应在无菌条件下进行，避免样品受到污染。

5.DNA提取
5.1 提取试剂盒
使用符合质量要求的DNA提取试剂盒。
5.2 提取方法
按照试剂盒说明书进行提取。

6.PCR反应体系
6.1 PCR反应体系
PCR反应体系应包括模板DNA、引物、酶、缓冲液和水。
6.2 引物
引物应选择特异性好、扩增效率高的引物。
6.3 酶
酶应选择高效、稳定的酶。
6.4 缓冲液
缓冲液应选择适合PCR反应的缓冲液。

7.PCR程序
7.1 PCR程序
PCR程序应包括预变性、变性、退火、延伸和保温等步骤。
7.2 PCR条件
PCR条件应根据引物和模板DNA的特性进行优化。

8.结果判定
8.1 结果判定
根据PCR扩增产物的大小和特异性进行结果判定。
8.2 结果分析
对于阳性样品，应进行测序分析以确定扩增产物的特异性。

相关标准：
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范与评价
GB/T 191-2008 包装、装运、储存标志和说明
GB/T 2828.1-2012 采样检验程序第1部分：按计划采样程序
GB/T 2829-2002 采样检验程序第2部分：抽样程序
GB/T 29415-2012 食品安全国家标准食品中基因改造成分检测方法 PCR法