桃是我国重要的果树之一,具有经济价值和生态价值。桃品种鉴定是桃树育种和品种保护的重要工作。传统的桃品种鉴定方法主要依靠形态学特征和生物学特性,但这些特征易受环境因素影响,存在一定的局限性。随着分子生物学技术的发展,利用分子标记进行桃品种鉴定已成为一种可靠、快速、准确的方法。
SSR(Simple Sequence Repeat)是一种广泛存在于基因组中的DNA序列重复单元,具有高度的多态性和稳定性,是进行品种鉴定和遗传多样性分析的理想分子标记。本标准采用SSR分子标记法进行桃品种鉴定,具体步骤如下:
1. 样品采集:从桃树上采集新鲜叶片或嫩枝,放入冰箱保存或直接进行DNA提取。
2. DNA提取:采用CTAB法或商用DNA提取试剂盒进行DNA提取。
3. SSR引物设计:根据已知的桃SSR序列,设计适合本地区桃品种的SSR引物。
4. PCR扩增:将DNA模板与引物进行PCR扩增,反应体系和程序根据引物设计和PCR试剂盒说明书进行设置。
5. 电泳分析:将PCR产物进行电泳分析,根据引物设计和PCR试剂盒说明书进行分析和判读。
本标准要求PCR扩增和电泳分析应在实验室条件下进行,操作人员应具备基本的分子生物学实验技能和安全意识。同时,为了保证结果的准确性和可比性,本标准还规定了实验室质量控制和数据分析的要求。
相关标准
GB/T 19212.1-2017 植物遗传多样性分析 分子标记技术 第1部分:通用要求
GB/T 19212.2-2017 植物遗传多样性分析 分子标记技术 第2部分:SSR标记
GB/T 19212.3-2017 植物遗传多样性分析 分子标记技术 第3部分:SNP标记
GB/T 19212.4-2017 植物遗传多样性分析 分子标记技术 第4部分:AFLP标记
GB/T 19212.5-2017 植物遗传多样性分析 分子标记技术 第5部分:RAPD标记