N-羟甲基蛋氨酸（HMTBa）是一种新型的氨基酸添加剂，具有高效、安全、环保等特点，被广泛应用于畜禽饲料中。HMTBa在饲料中的含量是衡量其营养价值的重要指标之一。因此，准确测定饲料中HMTBa的含量对于保证饲料质量、提高畜禽生产效益具有重要意义。

本标准采用高效液相色谱法（HPLC）测定饲料中HMTBa的含量。具体操作步骤如下：

1.样品制备
将饲料样品粉碎并过筛，取1g样品加入50mL离子交换水中，振荡30min，离心10min，取上清液过滤，取10mL上清液加入50mL离子交换水中，调节pH至7.0±0.1，即为待测样品。

2.色谱条件
色谱柱：C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）
流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（70:30，V/V）
流速：1.0mL/min
检测波长：254nm
进样量：20μL

3.标准曲线的绘制
取HMTBa标准品0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL，分别加入10mL离子交换水中，调节pH至7.0±0.1，用上述色谱条件进行测定，绘制标准曲线。

4.样品测定
取待测样品10mL，调节pH至7.0±0.1，用上述色谱条件进行测定，计算样品中HMTBa的含量。

相关标准
GB/T 6432-2018 饲料中氨基酸的测定
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