一、范围
本标准适用于饲料中西马特罗的测定。

二、引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
GB/T 6688-2008 分析化学实验室安全规程
GB/T 8170-2008 数字表示法和圆整规则
GB/T 14684-1993 液体色谱分析通用术语
GB/T 15202-1994 液体色谱分析中的检出限和定量限的计算方法

三、原理
样品经提取、净化后，采用高效液相色谱法进行测定。

四、仪器和设备
1. 高效液相色谱仪
2. 恒温水浴器
3. 离心机
4. 称量器
5. 紫外可见分光光度计

五、试剂和材料
1. 甲醇
2. 乙腈
3. 硝酸钠
4. 氢氧化钠
5. 氯仿
6. 硫酸
7. 氨水
8. 氯化钠
9. 蒸馏水

六、操作步骤
1. 样品制备
取适量样品，粉碎并混匀，称取0.5g样品，加入50mL甲醇，超声提取30min，离心10min，取上清液过滤，取10mL上清液加入10mL乙腈，离心10min，取上清液过滤，即为待测样品。
2. 标准曲线制备
取适量西马特罗标准品，加入甲醇中制成1mg/mL的标准溶液，再用甲醇稀释成0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg/mL的标准溶液，分别注入高效液相色谱仪进行测定，得到峰面积与浓度的标准曲线。
3. 样品测定
取待测样品10μL注入高效液相色谱仪进行测定，得到峰面积，根据标准曲线计算出样品中西马特罗的含量。

七、结果计算
样品中西马特罗的含量，按下式计算：
C=（A-B）/a×V
其中，C为样品中西马特罗的含量，μg/g；
A为待测样品的峰面积；
B为空白样品的峰面积；
a为标准曲线的斜率；
V为待测样品的体积，mL。

八、质量控制
1. 空白试验：取同样量的甲醇和乙腈，按样品制备方法进行操作，得到的峰面积应小于检测限。
2. 标准品测定：每次测定前应进行标准品测定，得到的峰面积应符合标准曲线。
3. 平行样品：对同一样品进行两次测定，结果应在一定误差范围内。

九、分析报告
分析报告应包括以下内容：
1. 样品名称、编号、重量、提取液体积、测定结果等；
2. 分析方法、仪器设备、试剂和材料等；
3. 分析结果的计算方法、标准曲线、质量控制等；
4. 分析结果的误差范围和可靠性等。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
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