：
一、范围
本标准规定了饲料中盐酸氯苯胍的测定方法，采用高效液相色谱法进行测定。该方法适用于饲料中盐酸氯苯胍的测定。

二、引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
GB/T 6688-2008 分析化学实验室安全规程
GB/T 8170-2008 数字表示法和圆整规则
GB/T 14684-1993 液体色谱分析通用术语
GB/T 15202-1994 液体色谱分析中的检出限和定量限的计算方法

三、仪器和设备
1. 高效液相色谱仪：包括泵、进样器、柱温箱、检测器等。
2. 色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
3. 称量仪：精度为0.1mg。
4. 超声波清洗仪：功率为100W，频率为40kHz。
5. 筛网：孔径为0.45μm。

四、试剂和材料
1. 盐酸氯苯胍标准品：纯度≥98%。
2. 甲醇：色谱纯。
3. 磷酸二氢钾：分析纯。
4. 磷酸氢二钠：分析纯。
5. 水：去离子水或蒸馏水。

五、样品的制备
将样品取1g，加入50mL甲醇中，超声波清洗10min，离心10min，取上清液过滤，取滤液10mL，加入10mL水，混合均匀，即为样品液。

六、操作步骤
1. 色谱条件
流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（体积比为70:30），pH值为3.0。
流速：1.0mL/min。
检测波长：254nm。
柱温：30℃。
进样量：20μL。

2. 标准曲线的绘制
取盐酸氯苯胍标准品0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL的6个浓度的标准溶液，分别进样，测定峰面积，绘制标准曲线。

3. 样品的测定
取样品液20μL进样，测定峰面积，根据标准曲线计算出样品中盐酸氯苯胍的含量。

七、计算
样品中盐酸氯苯胍的含量（mg/kg）=样品中盐酸氯苯胍的峰面积/标准曲线斜率×进样量×稀释倍数

八、结果表示
结果保留两位小数，单位为mg/kg。

九、质量控制
1. 标准品的制备：取盐酸氯苯胍标准品，用甲醇稀释至0.5mg/mL，保存在冰箱中。
2. 标准曲线的绘制：每次测定前，重新配制标准溶液，绘制标准曲线。
3. 空白试验：在样品制备过程中，不加入样品，进行空白试验，检测是否有干扰峰。
4. 平行试验：对同一样品进行两次测定，结果的相对标准偏差不得大于5%。

相关标准：
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
GB/T 6688-2008 分析化学实验室安全规程
GB/T 8170-2008 数字表示法和圆整规则
GB/T 14684-1993 液体色谱分析通用术语
GB/T 15202-1994 液体色谱分析中的检出限和定量限的计算方法