NY/T 3755-2020
豌豆品种真实性鉴定 SSR分子标记法
发布时间:2020-11-12 实施时间:2021-04-01
:
豌豆是一种重要的粮食作物,其品种真实性鉴定对于保障农业生产和市场秩序具有重要意义。SSR分子标记法是一种常用的分子生物学技术,可以通过检测DNA序列上的微卫星位点来鉴定豌豆品种的真实性。本标准旨在规范豌豆品种真实性鉴定的SSR分子标记法,以提高鉴定结果的准确性和可靠性。
1. 适用范围
本标准适用于豌豆品种真实性鉴定的SSR分子标记法。
2. 样品的采集
2.1 样品的选择
选择生长健壮、无病虫害的豌豆植株,采集新鲜叶片或嫩茎,避免采集老化或受损的组织。
2.2 样品的处理
将采集的样品放入离心管中,立即置于液氮中冷冻保存,或在-80℃冷冻保存。
3. DNA的提取
3.1 样品的研磨
将离心管中的样品取出,加入适量的液氮,用研钵和研钉研磨成细碎的粉末。
3.2 DNA的提取
按照基因组DNA提取试剂盒的说明书进行提取,得到纯度较高的DNA样品。
4. PCR扩增
4.1 引物的设计
根据豌豆基因组序列,设计适合豌豆品种真实性鉴定的SSR引物。
4.2 PCR反应体系
按照PCR试剂盒的说明书配置反应体系,包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq酶等。
4.3 PCR反应条件
按照引物设计的温度和PCR试剂盒的说明书进行PCR反应,得到扩增产物。
5. 电泳分析
将PCR扩增产物进行电泳分析,根据扩增产物的大小和数量,判断豌豆品种的真实性。
相关标准:
GB/T 20481-2006 豌豆种子品质检验方法
GB/T 20482-2006 豌豆种子品种纯度检验方法
GB/T 20483-2006 豌豆种子品种杂质检验方法
GB/T 20484-2006 豌豆种子品种活力检验方法
GB/T 20485-2006 豌豆种子品种萌发力检验方法