一、范围
本标准适用于动物源性食品中肌肽、鹅肌肽的测定。

二、引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价标准
GB/T 5009.5-2016 食品中氨基酸的测定
GB/T 5009.124-2016 食品中肽的测定
GB/T 22388.1-2020 食品中多肽的测定 第1部分：高效液相色谱法
GB/T 22388.2-2020 食品中多肽的测定 第2部分：液相色谱-串联质谱法

三、原理
样品经蛋白酶水解后，肌肽、鹅肌肽在酸性条件下转化为对应的酰胺，经过固相萃取柱净化后，采用高效液相色谱法进行分离和检测。

四、仪器设备和试剂
4.1 仪器设备
高效液相色谱仪、固相萃取柱、电子天平、超声波清洗器、pH计等。
4.2 试剂
甲醇、乙腈、乙酸、氯化钠、氯化铵、三氟乙酸、醋酸、酸化酶、蛋白酶等。

五、样品处理
样品经过蛋白酶水解后，加入酸化酶使肌肽、鹅肌肽转化为对应的酰胺，经过固相萃取柱净化后，用甲醇-水溶液重溶。

六、操作步骤
6.1 样品制备
将样品加入酸化酶，经过蛋白酶水解后，加入氯化钠、氯化铵等试剂，使肌肽、鹅肌肽转化为对应的酰胺。
6.2 固相萃取柱净化
将样品经过固相萃取柱净化，去除杂质。
6.3 色谱条件
采用高效液相色谱法进行分离和检测，流动相为甲醇-水溶液，检测波长为214 nm。
6.4 定量
根据标准曲线进行定量。

七、结果计算与表达
计算样品中肌肽、鹅肌肽的含量，单位为mg/kg。

八、质量控制
8.1 重复性
同一样品进行3次测定，相对标准偏差不大于5%。
8.2 平行样
同一样品进行2次测定，相对标准偏差不大于5%。
8.3 加标回收实验
在样品中加入已知量的肌肽、鹅肌肽，进行测定，回收率在80%~120%之间。

九、报告内容
报告中应包括样品名称、样品编号、测定结果、分析方法、检测限、质量控制等内容。

相关标准
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