斑蝥黄是一种常见的饲料添加剂，用于改善饲料的颜色和营养成分。然而，过量使用斑蝥黄会对动物的健康产生不良影响。因此，对饲料中斑蝥黄的测定显得尤为重要。

本标准采用高效液相色谱法进行测定。具体操作步骤如下：

1. 样品制备

将饲料样品取1g，加入50mL离子交换水中，振荡10min，离心10min，取上清液过0.45μm滤膜，取滤液10mL，加入10mL甲醇，振荡5min，离心10min，取上清液过0.22μm滤膜，即为待测样品。

2. 色谱条件

色谱柱：C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）

流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（30:70）

流速：1.0mL/min

检测波长：450nm

柱温：30℃

3. 标准曲线的制备

取斑蝥黄标准品0.1mg/mL的甲醇溶液，分别稀释为0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mg/L的标准溶液，用上述色谱条件进行测定，绘制标准曲线。

4. 样品测定

取待测样品10μL，用上述色谱条件进行测定，根据标准曲线计算斑蝥黄的含量。

相关标准
GB/T 5009.60-2003 食品中黄色素的测定 高效液相色谱法

GB/T 22223-2008 饲料中黄色素的测定 高效液相色谱法

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