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动物源细菌抗菌药物敏感性测试技术规程微量肉汤稀释法是一种常用的细菌敏感性测试方法，适用于动物源细菌的抗菌药物敏感性测试。本标准规定了该方法的要求和操作步骤，以确保测试结果的准确性和可靠性。

1.范围
本标准适用于动物源细菌的抗菌药物敏感性测试，包括细菌的分离、纯化、鉴定和抗菌药物敏感性测试等。

2.术语和定义
2.1 微量肉汤稀释法
微量肉汤稀释法是一种常用的细菌敏感性测试方法，通过对不同浓度的抗菌药物进行微量肉汤稀释，观察细菌生长情况，确定最小抑菌浓度（MIC）。

2.2 最小抑菌浓度（MIC）
最小抑菌浓度是指在微量肉汤稀释法中，能够完全抑制细菌生长的最低抗菌药物浓度。

3.要求
3.1 试验菌株应为动物源细菌，应经过分离、纯化和鉴定，确保菌株的纯度和鉴定准确性。
3.2 抗菌药物应为已知浓度的标准品，或者经过质量控制的药物制剂。
3.3 试验条件应符合微量肉汤稀释法的要求，包括培养基、温度、时间等。
3.4 试验结果应准确可靠，应进行质量控制和质量保证。

4.方法
4.1 准备试验菌株
4.1.1 从动物源分离、纯化和鉴定细菌菌株。
4.1.2 用生理盐水或者缓冲液调整菌株浓度，使其达到0.5麦克法（McFarland）浓度。
4.1.3 用无菌棉签将菌株涂布于培养基上，使其均匀生长。

4.2 准备抗菌药物
4.2.1 准备不同浓度的抗菌药物，应包括对照药物和待测药物。
4.2.2 抗菌药物应为已知浓度的标准品，或者经过质量控制的药物制剂。

4.3 进行微量肉汤稀释法
4.3.1 在96孔板中加入不同浓度的抗菌药物和肉汤，使其浓度逐渐减小。
4.3.2 在每个孔中加入相同浓度的试验菌株，使其浓度为0.5麦克法（McFarland）浓度。
4.3.3 在每个孔中加入肉汤，使其总体积为200微升。
4.3.4 在37℃下培养18-24小时，观察细菌生长情况，确定最小抑菌浓度（MIC）。

5.结果的判定
5.1 最小抑菌浓度（MIC）是指在微量肉汤稀释法中，能够完全抑制细菌生长的最低抗菌药物浓度。
5.2 根据MIC值，将抗菌药物分为敏感、中度敏感和耐药三类。
5.3 结果应进行质量控制和质量保证，确保结果的准确性和可靠性。

相关标准：
GB/T 4789.2-2016 食品微生物学检验 第2部分：肉、禽肉和肉制品
GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 第3部分：乳及乳制品
GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 第4部分：蛋及蛋制品
GB/T 4789.5-2016 食品微生物学检验 第5部分：水产品
GB/T 4789.10-2016 食品微生物学检验 第10部分：饮料