氢化可的松是一种广泛应用于畜禽饲料中的抗生素，但其过量使用会对动物健康产生不良影响，因此需要对饲料中氢化可的松进行测定。本标准适用于各种类型的饲料中氢化可的松的测定。

1. 原理
将饲料样品中的氢化可的松提取出来，经过净化和浓缩后，用高效液相色谱法进行分离和检测。

2. 仪器和设备
2.1 高效液相色谱仪
2.2 恒温振荡器
2.3 离心机
2.4 电子天平
2.5 紫外可见分光光度计

3. 试剂和材料
3.1 氢氧化钠
3.2 硫酸
3.3 甲醇
3.4 乙腈
3.5 纯水
3.6 氢化可的松标准品

4. 样品的制备
将饲料样品粉碎并混匀，取适量样品称重，加入一定量的水，用恒温振荡器振荡提取，离心后取上清液进行下一步操作。

5. 操作步骤
5.1 取适量提取液加入氢氧化钠和硫酸，进行水解反应。
5.2 加入甲醇和乙腈，进行提取。
5.3 用纯水洗涤提取液，进行净化。
5.4 用氮气吹干净化后的提取液，加入甲醇和乙腈混合溶液，进行浓缩。
5.5 加入纯水和甲醇混合溶液，进行再溶解。
5.6 用高效液相色谱法进行分离和检测。

6. 结果计算
用氢化可的松标准品进行外标法定量，计算样品中氢化可的松的含量。

相关标准
GB/T 5009.199-2017 饲料中氢化可的松的测定
GB/T 22223-2008 饲料中抗生素残留量的测定 高效液相色谱法
GB/T 22222-2008 饲料中抗生素残留量的测定 液相色谱法
GB/T 22221-2008 饲料中抗生素残留量的测定 毛细管电泳法
GB/T 22220-2008 饲料中抗生素残留量的测定 酶联免疫法